样品预处理

　　在待测样品中，DNA或RNA通常都是被蛋白包裹缠绕，根据不同的细胞和***样品的应用，可选择合适的预处理方法将靶核酸暴露：

　　内源性酶灭活：如果探针的检测是通过酶促法进行的，则样品内相应的内源性酶必须被灭活。如内源性的POD可通过含1%H2O2的甲醛溶液处理30min。如果检测酶为AP，可在底物溶液中加入左旋咪唑，AP检测的内源性背景一般来说比POD检测的低得多，因为在杂交过程中，样品中内源性AP酶的活性基本都丧失了。

　　RNase处理：在DNA-DNA杂交实验中，RNase的处理可去除内源性RNA，增加实验的信噪比。在进行mRNA为靶标的检测时，RNase处理的样品也可作为质控对照。通常的处理方式是将DNase-free的RNase溶解于2×***(100μg/ml)，样品在溶液中37℃处理60min。

  简单的说就是用各种动物当做实验的模型对象，来模拟人做科学研究的。比如说我们上学的时候都用过青蛙做实验，也有用鱼或者蚯蚓还有猫的，这些就是简单的一种造模了，通常来说在实验室里面用到的比较多的实验动物就是小白鼠了，这个我们大家都是有了解的。

用途有哪些 ：

      运用这种模技术的实验内容也是非常多的，具体的可以根据你要研究的不同科研项目来定，比如说你想实验一种因素如果作用在人类的身上会有什么影响或者造成什么效果的话，就可以先把这个因素作用在你要实验的动物身上，先观察一下具体反应，做好相关的实验记录，后在实验周期结束以后再观察一下实验动物的具体结果就可以了。比如说我们都知道小脑是支配我们***平衡能力的一个**系统，如果想实验这个理论的话，就可以用大头针对实验动物进行硬脑模穿刺，这样就可以摧毁动物的一侧小脑，等小脑被摧毁以后，你就可以看到实验的动物对象已经不能够维持基本的平衡了，会在桌子上不停的滚动，这个过程就是一个基本简单的实验动物造模。

肝纤维化动物模型造模方法：

1.法：

性肝纤维化产生的机理是Ⅲ型反应引起，白蛋白和的大分子物质，作为异种抗原进入大鼠体内后，刺激其产生相应的，当抗原再次进人机体后抗原结合，形成抗原—复合物(IC)，抗原的反复、长期刺激，过量的复合物来不及被清除，沉积于的血管壁内外，引起血管炎，造成肝损伤。反复导致肝细胞变性、坏死，再生，纤维等变化，后发展为肝纤维化、。

动物选用雄性Wistar大鼠，体重130g左右。取猪0.5ml，腹腔内***，每周2次，共8次(猪的制备：取新鲜猪血，离心制，滤过，分装放低温冰箱备用)。

评价:

大鼠第3周出现肝细胞变性、坏死，第4周的胶原纤维形成纤维束，从***静脉到门管区之间相互伸延，发生纤维化。

动物模型评价：

1. IDA大鼠早期(Hb≤100g/L)表现为毛发生长差、脱毛、眼球肿胀突出、苍白、兴奋为主，晚期(Hb≤60g/L)表现为倦怠、活动减少，易为主；

2. 血液学及生化检查表现为血红蛋白及铁(功能池)、浓度(交换池)、运铁蛋白及铁含量(贮存池)均显著低于正常对照组。其中以血红蛋

白和铁的变化较敏感。

3. 低铁饲料喂养大鼠5、6周即可出上述表现，F344、Wistar大鼠的反应性优于SD大鼠。

4. 此模型形成期短、稳定、可行，是研究IDA的一个可靠动物模型。