武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；收集斑马鱼的胚胎，在Holfretor水中培养，到达所需要的发育时期时，用蛋白酶去除卵膜，用4%多聚甲醛固定，在4℃保存，二十四小时后用50%2%多聚甲醛溶液洗，然后换成，在-20C保存，待用（两天和两天以上的胚胎需要用处理，去除色素。公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、日化产品生产平台；可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。

倒置平板，于37℃培养至划线的***菌落生长到0.5-1.0mm的宽度。 用已装防水黑色绘图墨水的针头穿透滤膜直至琼脂，在3个以上的不对称位置作标记。通过阳性对照可证明杂交过程中各个步骤以及所使用的***都合乎标准，实验方法可靠。在主平板大致相同的位置上也作上标记。用Parafilm膜封好主平板，倒置贮放于4℃，直至获得杂交反应的结果 裂解***，按本段下面所述方法，使释放的DNA结合于纤维素滤膜。

武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；利用此探针可对***、细胞或染色体中的DNA进行染色体及***水平的分析。公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、日化产品生产平台；可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。

杂交与显色

杂交将已标记的探针加入预杂交液即成为杂交液（探针浓度为1μg/m1），切片经2×***短暂浸洗后，滴加杂交液，于湿盒内置37℃或42℃孵育过夜。然后依次经2×***室温浸洗1h，l×***室温浸洗lh，0.5×*** 37℃浸洗30min，0.5×***室温浸洗30min。原位杂交是指用特定探针***、检测DNA、RNA的一种有效的实验方法，通过把特点序列到特殊载体上，通过转录酶反转一条天然的RNA探针，将探针和切片样品进行杂交，通过一系列显色方法，来确定RNA或者DNA表达区域。注意滴加杂交液时切片勿干燥。

武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、日化产品生产平台；可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。

显色以下各步均在室温下进行。将滤膜转到盛有150ml预杂交液的玻璃中，在适宜温度（即在水溶液中杂交时用68℃，而在50%甲酰胺中杂交时用42℃）下，预杂交1-2小时。

（1）缓冲液I洗1min。

（2）用含2%正常羊和0.3％TritonX-100的缓冲液I孵育切片30min。

（3）用含1％正常羊和0.3％TronX-100的缓冲液I稀释羊抗Dig。

（4）将稀释液滴加在切片上，封口膜覆盖，湿盒内4℃孵育过夜。

（5）缓冲液I洗10min。

（6）缓冲液Ⅱ洗10min。

（7）加显色液，封口膜覆盖，避光室温孵育2～20h，随时镜检，当显色满意时入缓冲液Ⅲ终止显色。

显色液临用前配，其配方为：①NBT 45μl；②X-Phospllate液 35μl；③左旋咪唑      2.4mg；④缓冲液Ⅱ 加至10ml。

（8）常规脱水、透明、封固。

结果：杂交阳性信号为紫蓝色颗粒。