(1)75% (体积分数)酒精消毒孕鼠,在无菌条件下取出胎鼠,分离并切取脊髓,置于冷的无钙、镁的HBSS液的平皿中( 下置冰袋)。

(2)解剖显微镜无菌条件下仔细剥离脊膜及血管。

(3)用弹簧剪将脊髓剪成1cm3大小，消化液37℃消化15-20min，每五分钟振荡一次；

(4)去掉上清，加入终止液终止消化，吹打10-15次，不能有气泡，收集上清，剩余***再消化一次。

(5)4℃1000rpm离心10min，弃上清，加入种植液1重悬，培养箱内差速贴壁30min；

(6)收集上清，台盼蓝染色计数，按6*105cells/孔种入六孔板（种植液1），37℃，5%CO2，95%饱和湿度的培养箱中培养；

(7)培养第二天，全换液更换为种植液2；

(8)培养第四天，半量换液加入5uM的，24h全量换液；

(9)之后每周换液两次。

常用检测技术

　　***病理学检测技术

　　实验室的检测人员可应用***的病理学以及学的相关技术和知识，对动物染病的部分***开展切片研究。

　　学检测技术

　　实验室检测人员应用学检测技术检测动物体内抗原和特异性状。

　　分子生物学检测技术

　　实验室检测人员通过应用生物学技术对动物***病毒的***进行科学诊断，同时***研究动物体内病原体***的变异状况。

　　以上就是动物实验检测技术在动物疫病防控中的作用！

在进行研究前，确定应用的探针类型。不同探针类型的优劣势请见上文描述。DNA探针的制备包括了前期的DNA片段分离纯化（或cDNA的）和酶促探针标记，可选随机引物标记法和缺口平移法等。RNA探针的制备包括了转录载体和转录法探针标记。寡核苷酸探针的制备要求先获得合成的寡核苷酸片段，再进行末端标记或加尾法探针标记。但无论采用何种标记探针及标记方法，对探针标记效果需进行终的评估，并准确计算探针浓度。

肝纤维化动物模型

模型概述：

1. 任何可引起肝损伤的因素长期、反复作用于，均可产生肝细胞变性、坏死，继而肝和纤维***，导致肝纤维化。

2. 已有化学性损伤、性、生物学、酒精性和营养性肝纤维化模型。每种方法因致病因素不同，给药途径不同，产生的机理、纤维化出现早晚、稳定性、出现率、重复性及机体自然患病过程相似程度等都不尽相同。