与血浆储存要求
大多数生化分析好的时间是收集后2小时内在室温下进行分析。如果或血浆样品不能在收集后2小时内进行处理,可将样品(放在加盖的试管中)放入4℃冰箱中短期储存(1周)或放入20℃或更冷的冰箱中长期储存(1周至6个月)。但有些指标检测例外,例如氨、乳酸盐和血气分析需要在采集后并在冰浴或4°C立即被分析。胆红素在暴露于直射光时会降解,因此血液用于胆红素分析应该避光(可用铝箔包裹离心管)。检测乳酸脱氢酶建议室温储存。
原位杂交涉及的步骤:玻片的准备和样品固定,细胞或***的预渗透处理,靶DNA变性(DNA原位杂交),探针制备,原位杂交过程,杂交后洗涤,探针(显色)检测。
玻片的准备和样品固定
对于染色体涂片,1:1的乙醇/醚处理的载玻片已能符合要求。对于***切片的原位杂交,为了在实验过程中不丢失***样品,可使用多聚赖氨酸或铬矾明胶包被的载玻片。
样品的固定步骤是为了保持样品的原有形态学。样品固定是原位杂交中的步骤,从化学反应角度来看,固定剂的使用和选择对后续杂交的影响不会太大,因为核酸杂交的功能分子基团被安全地包裹在DNA双螺旋结构中,而交联剂的使用对RNA基本没有影响。对于染色体涂片,常使用/固定;石蜡包埋的***切片用固定。冷冻切片可通过在4%的甲醛溶液中固定30min,或使用Bouin固定剂。
肝纤维化动物模型化学性损伤法:
雄性Wistar大鼠,体重130g左右,用腹腔内***,次20mg/100g体重,从第二次起12mg/100g体重,每周***2次,共8周。
评价:第3周,在肝小叶间中间带出现大片的肝细胞变性坏死和炎细胞浸润,炎细胞浸润、坏死细胞数和程度超过猪模型。6周后出现纤维束,纤维晚于和少于猪模型。大鼠肝纤维***中有I型胶原的mRNA增多。
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