原位杂交技术可应用于什么方面
1.细胞特异性mRNA转录的*** 可用于***图谱、***表达和***组进化的研究。
2.感6染***中病毒DNA/RNA的检测和***,如EB病毒mRNA、人类乳3头状瘤病毒和巨细胞病毒DNA的检测。
3.******、抑******及各种功能***在转录水平的表达及其变化的检测。
4.***在染色体上的***。
5.检测染色体的变化,如染色体数量异常和染色体易位等。
6.分裂间期细胞遗传学的研究,如遗传病的产前诊断和某些遗传
杂交流程
杂交液的成分主要影响了核酸杂交的复性动力学和热稳定性。杂交液的基础成分为:Denhardt’s溶液(Ficoll,BSA,PVP),异源核酸(如鲱精3子DNA/tRNA/竞争DNA),磷酸钠,EDTA,SDS,盐离子,甲酰胺和***葡聚糖,以及杂交探针。不同的应用中进行杂交温度、pH、盐离子、甲酰胺、探针浓度等条件的优化。常用的pH范围为6.5~7.5,较高的pH值有助于提高杂交的严谨性。
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