原位杂交***承诺守信「多图」
作者:思特进2022/6/17 19:53:38









原位杂交技术可应用于什么方面

1.细胞特异性mRNA转录的*** 可用于***图谱、***表达和***组进化的研究。

2.感6染***中病毒DNA/RNA的检测和***,如EB病毒mRNA、人类乳3头状瘤病毒和巨细胞病毒DNA的检测。

3.******、抑******及各种功能***在转录水平的表达及其变化的检测。

4.***在染色体上的***。

5.检测染色体的变化,如染色体数量异常和染色体易位等。

6.分裂间期细胞遗传学的研究,如遗传病的产前诊断和某些遗传









原位杂交技术应用于染色体、细胞和***切片等样品中进行核酸特异性检测,与免6疫组化技术的结合应用,能将DNA、mRNA和蛋白水平上的***活性与样品的显微拓扑信息结合起来。1969年Pardue和Gall将放9射性标记的探针直接应用于纯化核酸的杂交,此后得益于分子克6隆技术的发展,及不同探针标记系统和检测系统的应用,大大增加了原位杂交检测的应用灵活性和检测灵敏度。



杂交流程

杂交液的成分主要影响了核酸杂交的复性动力学和热稳定性。杂交液的基础成分为:Denhardt’s溶液(Ficoll,BSA,PVP),异源核酸(如鲱精3子DNA/tRNA/竞争DNA),磷酸钠,EDTA,SDS,盐离子,甲酰胺和***葡聚糖,以及杂交探针。不同的应用中进行杂交温度、pH、盐离子、甲酰胺、探针浓度等条件的优化。常用的pH范围为6.5~7.5,较高的pH值有助于提高杂交的严谨性。



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