动物模型欢迎来电「多图」
作者:思特进2022/5/30 15:01:39






(1)75% (体积分数)酒精消毒孕鼠,在无菌条件下取出胎鼠,分离并切取脊髓,置于冷的无钙、镁的HBSS液的平皿中( 下置冰袋)。

(2)解剖显微镜无菌条件下仔细剥离脊膜及血管。

(3)用弹簧剪将脊髓剪成1cm3大小,消化液37℃消化15-20min,每五分钟振荡一次;

(4)去掉上清,加入终止液终止消化,吹打10-15次,不能有气泡,收集上清,剩余***再消化一次。

(5)4℃1000rpm离心10min,弃上清,加入种植液1重悬,培养箱内差速贴壁30min;

(6)收集上清,台盼蓝染色计数,按6*105cells/孔种入六孔板(种植液1),37℃,5%CO2,95%饱和湿度的培养箱中培养;

(7)培养第二天,全换液更换为种植液2;

(8)培养第四天,半量换液加入5uM的,24h全量换液;

(9)之后每周换液两次。


样品预处理

  在待测样品中,DNA或RNA通常都是被蛋白包裹缠绕,根据不同的细胞和***样品的应用,可选择合适的预处理方法将靶核酸暴露:

  内源性酶灭活:如果探针的检测是通过酶促法进行的,则样品内相应的内源性酶必须被灭活。如内源性的POD可通过含1%H2O2的甲醛溶液处理30min。如果检测酶为AP,可在底物溶液中加入左旋咪唑,AP检测的内源性背景一般来说比POD检测的低得多,因为在杂交过程中,样品中内源性AP酶的活性基本都丧失了。

  RNase处理:在DNA-DNA杂交实验中,RNase的处理可去除内源性RNA,增加实验的信噪比。在进行mRNA为靶标的检测时,RNase处理的样品也可作为质控对照。通常的处理方式是将DNase-free的RNase溶解于2×***(100μg/ml),样品在溶液中37℃处理60min。




   除了上面说到的那种比较基础的造模以外,还有针对各种人类疑难病症的动物实验,用到的动物种类也是有所区别的,比如说小一些的实验小白鼠的主要作用是尝试各种物药的安全性方面的实验以及各种不同的生物制品检验方面

      对于的造模来说,通常都是有一些常规的动物操作的,比如说像***,灌胃以及取血实验等,像实验的小白鼠或者兔子还会进行一些腹部或者劲部的类操作,特别是实验小白鼠还有移植相应的模型的相关***操作,主要的目地就是为了更好的研究各种的产生以及相关的方法。




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