(1)75% (体积分数)酒精消毒孕鼠,在无菌条件下取出胎鼠,分离并切取脊髓,置于冷的无钙、镁的HBSS液的平皿中( 下置冰袋)。
(2)解剖显微镜无菌条件下仔细剥离脊膜及血管。
(3)用弹簧剪将脊髓剪成1cm3大小,消化液37℃消化15-20min,每五分钟振荡一次;
(4)去掉上清,加入终止液终止消化,吹打10-15次,不能有气泡,收集上清,剩余***再消化一次。
(5)4℃1000rpm离心10min,弃上清,加入种植液1重悬,培养箱内差速贴壁30min;
(6)收集上清,台盼蓝染色计数,按6*105cells/孔种入六孔板(种植液1),37℃,5%CO2,95%饱和湿度的培养箱中培养;
(7)培养第二天,全换液更换为种植液2;
(8)培养第四天,半量换液加入5uM的,24h全量换液;
(9)之后每周换液两次。
常用检测技术
***病理学检测技术
实验室的检测人员可应用***的病理学以及学的相关技术和知识,对动物染病的部分***开展切片研究。
学检测技术
实验室检测人员应用学检测技术检测动物体内抗原和特异性状。
分子生物学检测技术
实验室检测人员通过应用生物学技术对动物***病毒的***进行科学诊断,同时***研究动物体内病原体***的变异状况。
以上就是动物实验检测技术在动物疫病防控中的作用!
动物模型评价:
1. IDA大鼠早期(Hb≤100g/L)表现为毛发生长差、脱毛、眼球肿胀突出、苍白、兴奋为主,晚期(Hb≤60g/L)表现为倦怠、活动减少,易为主;
2. 血液学及生化检查表现为血红蛋白及铁(功能池)、浓度(交换池)、运铁蛋白及铁含量(贮存池)均显著低于正常对照组。其中以血红蛋
白和铁的变化较敏感。
3. 低铁饲料喂养大鼠5、6周即可出上述表现,F344、Wistar大鼠的反应性优于SD大鼠。
4. 此模型形成期短、稳定、可行,是研究IDA的一个可靠动物模型。
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