(1)75% (体积分数)酒精消毒孕鼠,在无菌条件下取出胎鼠,分离并切取脊髓,置于冷的无钙、镁的HBSS液的平皿中( 下置冰袋)。

(2)解剖显微镜无菌条件下仔细剥离脊膜及血管。

(3)用弹簧剪将脊髓剪成1cm3大小，消化液37℃消化15-20min，每五分钟振荡一次；

(4)去掉上清，加入终止液终止消化，吹打10-15次，不能有气泡，收集上清，剩余***再消化一次。

(5)4℃1000rpm离心10min，弃上清，加入种植液1重悬，培养箱内差速贴壁30min；

(6)收集上清，台盼蓝染色计数，按6*105cells/孔种入六孔板（种植液1），37℃，5%CO2，95%饱和湿度的培养箱中培养；

(7)培养第二天，全换液更换为种植液2；

(8)培养第四天，半量换液加入5uM的，24h全量换液；

(9)之后每周换液两次。

常用检测技术

　　***病理学检测技术

　　实验室的检测人员可应用***的病理学以及学的相关技术和知识，对动物染病的部分***开展切片研究。

　　学检测技术

　　实验室检测人员应用学检测技术检测动物体内抗原和特异性状。

　　分子生物学检测技术

　　实验室检测人员通过应用生物学技术对动物***病毒的***进行科学诊断，同时***研究动物体内病原体***的变异状况。

　　以上就是动物实验检测技术在动物疫病防控中的作用！

肝纤维化动物模型造模方法：

1.法：

性肝纤维化产生的机理是Ⅲ型反应引起，白蛋白和的大分子物质，作为异种抗原进入大鼠体内后，刺激其产生相应的，当抗原再次进人机体后抗原结合，形成抗原—复合物(IC)，抗原的反复、长期刺激，过量的复合物来不及被清除，沉积于的血管壁内外，引起血管炎，造成肝损伤。反复导致肝细胞变性、坏死，再生，纤维等变化，后发展为肝纤维化、。

动物选用雄性Wistar大鼠，体重130g左右。取猪0.5ml，腹腔内***，每周2次，共8次(猪的制备：取新鲜猪血，离心制，滤过，分装放低温冰箱备用)。

评价:

大鼠第3周出现肝细胞变性、坏死，第4周的胶原纤维形成纤维束，从***静脉到门管区之间相互伸延，发生纤维化。

1、致模因素对动物模型的影响

应明确研究目的，清楚相应人类***的发生、临床症状和发病机制，熟悉致病因素对动物所产生的临床症状和发病情况，致病因素的剂量。

2、动物因素对动物模型的影响  

品种、品系、年龄体重、性别、生理状态等

3、实验技术因素对动物模型的影响

实验季节、昼夜过程、深度、***技巧、实验给药、对照组的影响等。

4、环境因素和营养因素对动物模型的影响

模型的成败往往与环境的改变有密切关系。拥挤、饮食改变、过度光照、噪音、屏障系统的***等，任何一项被忽视都可能给模型动物带来严重影响。