武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、日化产品生产平台；可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。此外，原位杂交还是显示细胞亚群分布和动向及病原微生物存在方式和部位的一种重要技术。

　原位杂交是指用特定探针***、检测DNA、RNA的一种有效的实验方法，通过把特点序列到特殊载体上，通过转录酶反转一条天然的RNA探针，将探针和切片样品进行杂交，通过一系列显色方法，来确定RNA或者DNA表达区域；本中心原位杂交探针采用的是和生物素标记，灵敏度和同位素相当。通过阳性对照可证明杂交过程中各个步骤以及所使用的***都合乎标准，实验方法可靠。 我们采用roche标记及显色***盒，GISH/ISH/FISH按照探针进行收费，每个***盒每条探针可以杂交60-80张玻片，收费为1万5千元，GISH杂交因需要加抗淬灭剂每条探针收费为1万9千元。量大优惠！

武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、日化产品生产平台；可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。FISH是原位杂交技术大家族中的一员，因其所用探针被荧光物质标记（间接或直接）而得名，该方法在80年代末被发明，现已从实验室逐步进入临床诊断领域。

***原位杂交（Tissue in situ hybridization）简称原位杂交，指***或细胞的原位杂交，它与菌落原位杂交不同，菌落原位杂交需裂解***释出DNA，然后进行杂交，而原位杂交是经适当处理后，使细胞通透性增加，让探针进入细胞内与DNA或RNA杂交，因此原位杂交可以确定探针互补序列在胞内的空间位置，这一点具有重要的生物学和病理学意义。双链核酸分子加热至80～100℃时，碱基对之间的氢键断开，形成两条单链，这一过程叫作核酸的变性作用或解链。

武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、日化产品生产平台；可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。省去标记探针在做原位杂交时，以PBS或预杂交液替代杂交液，结果应为阴性，这是一种简便而有意义的阴性对照实验。

显色以下各步均在室温下进行。

（1）缓冲液I洗1min。

（2）用含2%正常羊和0.3％TritonX-100的缓冲液I孵育切片30min。

（3）用含1％正常羊和0.3％TronX-100的缓冲液I稀释羊抗Dig。

（4）将稀释液滴加在切片上，封口膜覆盖，湿盒内4℃孵育过夜。

（5）缓冲液I洗10min。

（6）缓冲液Ⅱ洗10min。

（7）加显色液，封口膜覆盖，避光室温孵育2～20h，随时镜检，当显色满意时入缓冲液Ⅲ终止显色。

显色液临用前配，其配方为：①NBT 45μl；②X-Phospllate液 35μl；③左旋咪唑      2.4mg；④缓冲液Ⅱ 加至10ml。

（8）常规脱水、透明、封固。

结果：杂交阳性信号为紫蓝色颗粒。

武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、日化产品生产平台；可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。核酸分子在pH〉10和pH〈3的环境中也会变性，当条件适合时又可复性。

原位杂交对照试验

同***化学染色对照一样，为证明原位杂交实验操作的准确性和实验结果的特异性，需要设置一系列对照实验，具体的各种对照实验的设置及其意义请参考原位杂交专著，以下仅介绍几种常用的对照实验。