原位杂交是指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或***切片中核酸进行杂交，从而对特定核酸顺序进行精0准确定量***的过程。原位杂交可以在细胞标本或***标本上进行。

原位杂交（in situ hybridization）将标记的核酸探针与细胞或***中的核酸进行杂交，称为原位杂交。

使用DNA或者RNA探针来检测与其互补的另一条链在***或其他真核细胞中的位置。

原位杂交技术可应用于什么方面

1.细胞特异性mRNA转录的***　可用于***图谱、***表达和***组进化的研究。

2.感6染***中病毒DNA/RNA的检测和***，如EB病毒mRNA、人类乳3头状瘤病毒和巨细胞病毒DNA的检测。

3.******、抑******及各种功能***在转录水平的表达及其变化的检测。

４.***在染色体上的***。

5.检测染色体的变化，如染色体数量异常和染色体易位等。

6.分裂间期细胞遗传学的研究，如遗传病的产前诊断和某些遗传

原位杂交(In Situ Hybridization)也叫原位杂交组化(in situ hybridization histochemistry, ISHH)，是一种固相分子杂交的方法，bai它是用标记的DNA或RNA为探针，在原位检测***或细胞内特定核酸序列的方法。探针的种类按所带标记物可分为同位素标记探针和非同位素标记探针两大类。常用的同位素标记物有3H、35S、125I和32P，非同位素标记物中目前很常用的有生物素、地高6辛和荧光素三种。探针的种类按核酸性质不同又可分为DNA探针、cDNA探针、RNA探针和合成寡核苷酸探针。

原位杂交术可在原位检测细胞合成某种多肽或蛋白质的***表达，有很高的敏***和特异性，已成为细胞生物学、分子生物学研究的重要手段。

就DNA探针和RNA探针的比较，DNA探针在杂交过程中会出现探针双链之间退火的可能，也更倾向于在溶液中形成大分子的探针聚合体，从而影响其渗透能力。而RNA 探针的应用，将提高DNA-RNA杂交子的热稳定性。

Tips：RNA探针因其单链、高分子结合力、可适应高温杂交的特性，其检测特异性和灵敏度均优于DNA探针。常用的RNA探针标记方法为构建质粒后进行转率合成。通过PCR扩增的方法，可以更方便地进行RNA探针的制备；RNA探针合成后，还需验证其对目标片段检测的灵敏度和特异性。