武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、日化产品生产平台；由于其编码蛋白的N-端具有高度保守的WRKYGQK氨基酸残基序列,人们将其命名为WRKY。可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。
目的研究1个白木香倍半萜合酶(ASS)的亚细胞***,确定其功能区域,并比较3种瞬时表达体系在亚细胞***研究中的优劣。方法从白木香愈伤***中提取总RNA,采用特异引物RT-PCR方法倍半萜合酶ASS***,并连接于pEZS-NL载体和pFGC5941GFP改造载体上,分别构建pFGC5941-GFP-ASS、pEZS-NL-ASS-GFP 2种植物表达载体,分别利用根***农侵染叶片、***轰击洋葱表皮细胞、PEG转化白木香原生质体3种技术进行瞬时转化表达,激光共聚焦显微镜下观察表达出的绿色荧光蛋白(GFP)融合蛋白的亚细胞***。结果在叶片表皮细胞、洋葱表皮细胞及白木香原生质体中,融合蛋白绿色荧光均能被观察到。ASS***与GFP的融合蛋白产物在叶片中***于胞质,在洋葱表皮中***于胞质和细胞核,白木香原生质体中***于胞质和质体。通过冻融法将重组质粒pBRSAg转入根***农LBA4404中，利用农介导法转化叶盘，经筛选培养获得植株。结论 ASS***在白木香原生质体胞质及质体***;对3种体系的结果比较表明,应用不同体系研究蛋白的亚细胞***可能出现不同的结果,这可能与同源或异源表达的植物细胞的特性有关。
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、日化产品生产平台；OsSsrl表达水平受干旱、高温、高盐、低温、机械伤害、稻瘟病菌、MeJA和ABA的诱导上调。可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。
几丁质酶(chitinase)是一种能够将几丁质水解成N-乙酰葡糖胺的糖苷酶,广泛存在于植物细胞中,是抗***防卫反应体系的重要组成部分.该文深入分析了1种三七几丁质酶***PnCHI1的功能.构建PnCHI1的亚细胞***载体,转入洋葱表皮细胞中瞬时表达,在激光扫描共聚焦显微镜下发现PnCHI1***于细胞壁中.构建PnCHI1的原核表达载体,诱导并纯化获得重组蛋白,体外平板抑菌实验结果显示PnCHI1原核重组蛋白对尖孢镰刀菌、茄腐镰刀菌、轮枝镰刀菌3种三七根腐病菌的菌丝生长具有很强的***活性.采用反向遗传学技术验证PnCHI1的功能,通过根***农介导将PnCHI1转入中过量表达.qRT-PCR分析结果表明PnCHI1在T2代中大量表达,同时叶片接种实验显示PnCHI1对茄腐镰刀菌的抗性增强明显.结论:PnCHI1是***于细胞壁的几丁质酶,体外能***几种三七根腐病***,在过表达大大提高了对茄腐镰刀菌的抗性,推测PnCHI1是三七中参与根腐病防卫反应的重要抗病***.
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、日化产品生产平台；荧光显微镜下观察结果显示,GFP***在经浸染和共培养后的洋葱表皮细胞中得到了表达,绿色荧光分布在细胞核和细胞质中,为进一步研究新***的亚细胞***和瞬时表达奠定了基础。可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。
植物中,WRKY转录因子家族成员众多,近年来成为植物分子生物学研究的热点。由于其编码蛋白的N-端具有高度保守的WRKYGQK氨基酸残基序列,人们将其命名为WRKY。其保守的WRKY结构域能与下游***启动子W-box特异性结合,从而调控下游***的表达水平。目前,诸多研究结果表明,WRKY转录因子在植物中参与生物胁迫、非生物胁迫、种子发育、种子休眠与萌芽、形态建成、***等方面的表达调控。 前人研究表明,拟南芥转录因子AtWRKY70的表达水平受水杨酸诱导,与该信号途径当中的抗病反应相关联。与型相比,超量表达AtWRKY70的拟南芥植株对青花菜褐茎病(Hyaloperonospora parasitica)、假单胞菌(Pseudomonas syringae)等***病表现出了更强的抗性,而对欧文氏软腐菌(Erwinia amylovora)等***病则更敏感。同时发现,AtWRKY70对植物的***起负调控作用。脂肪酸合成酶(FAS)催化乙酰酶A和丙二酸单酰辅酶A合成脂肪酸,从而在动物体脂沉积中发挥重要作用。序列对比分析表明,在杨树当中,PtWRKY89与AtWRKY70高度同源,然而,对于PtWRKY89生物学功能的研究至今尚未报道。本中,我们首先了PtWRKY89***,并对其进行了***表达分析及亚细胞***,进一步构建载体转化毛白杨,在植株中分析了该转录因子在病害胁迫生理过程中的调控作用。
