原位杂交***电话「多图」
作者:思特进2021/12/6 9:52:51






多彩色荧光原位杂交技术多彩色荧光原位杂交(Multicolor fluorescence in situ hybridization,mFISH)是在荧光原位杂交技术的基础上发展起来的一种新技术,它用几种不同颜色的荧光素单独或混合标记的探针进行原位杂交,能同时检测多个靶位,各靶位在荧光显微镜下和照片上的颜色不同,呈现多种色彩,因而被称为多彩色荧光原位杂交。它克服了FISH技术的局限,能同时检测多个***,在检测遗传物质的突变和染色体上******等方面得到了广泛的应用(杨明杰等1998)。




原位杂交是指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或***切片中核酸进行杂交,从而对特定核酸顺序进行精3确定量***的过程。原位杂交可以在细胞标本或***标本上进行。

原位杂交技术(In situ hybridization,ISH)是分子生物学、***化学及细胞学相结合而产生的一门新兴技术,始于20世纪60年代。

原位PCR;原位杂交细胞***和PCR的高灵敏度相结合的技术,在细胞(爬片、甩片或涂片)或***(石蜡、冰冻切片)上直接对靶***片段进行扩增,通过掺入标记基团直接显色或结合原位杂交进行检测的方法。




原位杂交;原位杂交(in situ hybridization)将标记的核酸探针与细胞或***中的核酸进行杂交,称为原位杂交!

使用DNA或者RNA探针来检测与其互补的另一条链在***或其他真核细胞中的位置。

以菌落原位杂交为例:对分散在若干个琼脂平板上的少数菌落(100-200)进行克8隆筛选时,可采用本方法。将这些菌落归并到一个琼脂主平板以及已置于第二个琼脂平板表面的一张硝5酸纤维素滤膜上。经培养一段时间后,对菌落进行原位裂解。主平板应贮存于4℃直至得到筛选结果。




总的来说,随探针浓度增加,杂交率也增加。另外,在较窄的范围内,随探针浓度增加,敏***增加。依我们的经验,要获得较满意的敏***,膜杂交中32P标记探针与非放0射性标记探针的用量分别为5~10 ng/ml和25~1000ng/ml,而原位杂交中,无论应用何种标记探针,其用量均为0.5~5.0μg/ml。探针的任何内在物理特性均不影响其使用浓度,但受不同类型标记物的固相支持物的非特异结合特性的影响。



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