不管是哪一种ELISA，它的操作都由以下几种基本的操作组合而成：①将抗原或***吸附到固相载体上；②加入待检样品以及后续***；③温育；④洗涤去掉游离未结合的反应物；⑤加入酶检测底物；⑥结果的判读。

ELISA操作步骤复杂，影响反应因素较多。

测定小分子量物质常用竞争法，其标准曲线中吸光度与受检物质的浓度呈负相关。

测定大分子量物质的夹心法ELISA，标准曲线的范围一般较宽，曲线***高点的吸光度可接近2.0，绘制时常用半对数值，以检测物的浓度为横坐标，以吸光度为纵坐标，将各浓度的值逐点连接，所得曲线一般呈S形，其头、尾部曲线趋于平坦，***较呈直线的部分是***理想的检测区域。

ELISA的基础是抗原或***的固相化及抗原或***的酶标记。

***测定技术的基础在于抗原***之间的特异结合反应。以前用于***测定的抗原通常为各种纯化抗原，而***则为纯化抗原***动物后获得的多******和使用杂交瘤技术得到的单******，而抗原或***的标记物如酶标结合物则通过各种化学合成方法制备。

影响Elisa试验结果的因素很多，故加强各个环节的质量的保证才能充分发挥其方法学的优点。

近年来，随着分子生物学的发展，使用***工程方法制备各种特殊的抗原或***及其酶结合物等***测定***几成为现实的新一代***，各种新型使用的测定方法也不断出现。

ELISA检测***盒应用定性夹心***检测技术，用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板条，这些多肽是中国型HEV毒株nucleus 氨基酸序列中抗原性很强的肽段，分别来自于该毒株的开放阅读框2和开放阅读框3。