线性关系
cAMP浓度为16.0pmol/mL的样品,用0.1M HCl进行连续七次1:2梯度稀释。将实际的cAMP浓度和测定的cAMP浓度绘制图表。该直线的斜率为1.000,相关系数为0.999。
交叉反应
部分相关化合物的交叉反应由竞争ELISA测定。将可能的交叉反应物溶解到***盒分析缓冲液中,浓度从500pmol/mL至500,000pmol/mL。这些样品通过乙酰化在cAMP竞争分析中被测定,通过比较样品中交叉***的实际浓度,可以计算出交叉反应,并用百分比(%)表示。
通过鸟苷酸环化酶可以实现GTP转化为cGMP。在哺乳动物中,存在2种类型的鸟苷酸环化酶:可溶性及膜结合的鸟苷酸 环化酶(8,10,11)。可溶性环化酶在一氧化氮与血红素辅基结合后,即被激l活。七层膜结合鸟苷酸环化酶(即跨膜鸟苷酸环化酶或鸟苷酸环化酶微粒)已被证实存在于人类***组中,鸟苷酸环化酶A和B是利l尿钠肽受体,鸟苷酸环化酶C能被热稳定***肠毒l素、鸟苷素和脲激l活。跨膜鸟苷酸环化酶的活性亦受胞内信号通路的其他受体信号所调控。
武汉纽斯特生物科技有限公司(WuhanNewEastBiotechonologyCo.Ltd),系美国生命科学***供应商美国NewEastBio在中国的子公司。公司位于武汉东湖高新技术开发区光谷生物城.美国NewEastBio专注于生命科学和生物技术领域,主要产品有小分子、ELISA***盒、蛋白等,与世界高校和研究所、世界大制药公司、生物科技公司和***等客户建立了长期稳定的合作关系,产品销往世界。
注意步骤
在使用前,将所有***放置30分钟,平衡至室温。
用***预先润洗头在使用;取各种样品、标准品和***必需更换头。
移取标准品和样品到微孔底部。
从微孔的边缘加入***,以避免污染。
该***盒使用可拆分的微孔酶标条,使用者可根据样品量多少进行拆分。未使用的酶标条保持干燥,密封于***盒提供的铝封袋中,于4℃保存。微孔酶标条需安装在相应的框架上使用。
在加入显色底物前,确保微孔内没有残留的洗涤液。微量残留的洗涤液可能导致分析结果的变化。
Ras活性分析。纯化的Ras蛋白分别用GDP (Lane 1)和GTPγS (Lane 2)进行活化。然后用特异性识别Ras活性构象的鼠单克l隆抗l体(Cat. # 26909)孵育。活性Ras珠子颗粒用特异性识别Ras活性构象的兔多克l隆抗l体(Cat # 21021)进行免l疫印迹实验。图展示的是Ras-GDP和Ras-GTPγS的Western blot实验结果。
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