本***盒利用竞争酶联免l疫分析方法来测定细胞提取物或体外腺苷酸环化酶实验中的cAMP的水平。简而言之,将羊抗鼠多克l隆抗l体包被在酶标板上,细胞提取物或体外腺苷酸环化酶实验中的cAMP与固定数量的偶联辣根过氧化物酶的cAMP或碱性磷酸酶竞争性的结合抗cAMP单克l隆抗l体,已知的cAMP作为标准品来做标准曲线。经过一段时间孵育,洗掉所有***,加入底物进行显色。将多孔板置于酶标l仪上,于450nm或405nm波长下,进行读数。***的光强度与样品中cAMP的浓度呈反比关系。基于cAMP标准品所得曲线,通过测得的光密度可以计算出样品中cAMP的浓度。
注意步骤
1. 在使用前,将所有***放置30分钟,平衡至室温。
2. 用***预先润洗头在使用;取各种样品、标准品和***必需更换头。
3. 移取标准品和样品到微孔底部。
4. 从微孔的边缘加入***,以避免污染。
5. 本***盒使用可拆分的微孔酶标条,使用者可根据样品量多少进行拆分。未使用的酶标条保持干燥,密封于***盒提供的铝封袋中,于4℃保存。微孔酶标条需安装在相应的框架上使用。
6. 在加入显色底物前,确保微孔内没有残留的洗涤液。微量残留的洗涤液可能导致分析结果的变化。
武汉纽斯特生物科技有限公司(WuhanNewEastBiotechonologyCo.Ltd),系美国生命科学***供应商美国NewEastBio在中国的子公司。公司位于武汉东湖高新技术开发区光谷生物城.美国NewEastBio专注于生命科学和生物技术领域,主要产品有小分子、ELISA***盒、蛋白等。
酶标记抗l体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗l体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗l体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
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