人环磷酸腺苷 cGMP ELISA即时留言「武汉纽斯特」
作者:武汉纽斯特2022/6/6 3:15:17













包括以下步骤:1)抗原表位的计算机筛选;2)抗原的制备;3)血l清的采集;4)间接ELISA方法的建立;5)间接ELISA方法的敏***和特异性验证;6)***盒的稳定性验证;7)对屠宰场进行临床检测。该方法简单、快速、灵敏度高、特异性强、稳定性合格、重复性好。应用本发明制得的***盒能有效检出感l染猪的戊型肝l炎病毒,适用于大批量发病样本的检测,可用于猪戊肝的快速诊断,并预防、控制猪戊肝l病毒的流行和阻断戊肝l病毒由猪向人传播。




包被抗l体(或抗原)的选择:将抗l体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。蛋白质包被的较适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值较大而蛋白量较少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。

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酶标记抗l体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗l体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗l体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。


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