功能获得性突变
也称为激l活突变,改变的***产物,使其功能变强(增强激l活),甚至被不同的异常功能所取代。当新等位***被创建时,含有新创建等位***和原始等位***的杂合子将表达新的等位***。
显性负突变
也称为抗形态突变,改变的***产物与野l生型等位***产物的作用相拮抗。这些突变通常导致分子功能改变(通常无活性),并且以显性或半显性表型为特征。
同义突变和非同义突变
点替换突变导致的单个核苷酸变化引起的突变可以是同义突变也可以是非同义突变。 同义替换突变将密码子替换为编码相同氨基酸的另一密码子,其蛋白质序列没有改变。同义突变源于遗传密码的简并性。如果同义突变不导致任何表型变化,那么这种同义突变也被称为沉默突变。但并非所有同义突变都是沉默突变。
非同义替换将密码子替换为编码不同氨基酸的另一密码子,从而产生经过改变的蛋白质。这种点突变称为非同义突变。非同义突变又可分为无义突变和错义突变。
重组Erb-B2的免l疫印迹分析
蛋白质。纯化了His标记的Erb-B2蛋白(Cat。
#10208)用抗Erb-B2印迹
单克l隆抗l体(Cat。#26127页)。
免l疫***化学分析
石蜡包埋人乳l腺***
抗Erb-B2单克l隆抗l体***
(猫。#26127页)。***样本用
甲醛和1%血l清封闭15次
37°C时***小值。抗原回收是通过加热进行的
在柠檬酸盐缓冲液(pH6)中进行调解。样本是
然后用一级抗l体(1:50)孵育
稀释)在4°C下过夜。HRP共轭
以山羊抗鼠IgG(1:50稀释液)作为对照
次级抗l体。
表达细胞的免l疫荧光
抗ERBB2蛋白(D769Y)
抗l体。转染HEK293T细胞
pCDNA3-GFP-ERBB2(D769Y)质粒,pCDNA3-GFP-ERBB2(WT)质粒或
pCDNA3-GFP-ERBB2(D769H)质粒,固定后用抗ERBB2(D769Y)染色
单克l隆抗l体(Cat。#26382页)。
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