***盒储存要求
本***盒所有组分在有效期限内,于4℃稳定保存。为了长效的实验,1000×储液请保存于-80℃。本***盒未提供的必需***
1. 去离子水或蒸馏水。
2. 浓盐酸。
3. 量程在5μL至1000μL之间的精密移液管。
4. 量程为50μL和200μL的中继移液器。
5. 用于稀释储液的一次性烧杯。
6. 刻度量筒。
7. 微孔板振荡器。
8. 吸水纸。
9. 酶标l仪,可读波长450nm,在570nm至590nm之间应有修正。
***准备
1. 非乙酰化cAMP标准品
将5000 pmol/mL cAMP标准品溶液平衡至室温。从#1至#6标记六只洁净试管。移取475μL 0.1M HCl到#1号试管,400μL到#2至#6号试管。加入25μL 5000 pmol/mL cAMP标准品到#1管中,剧烈涡旋震荡。从#1管中取出100μL溶液至#2管中,涡旋震荡。以此类推,重复上步操作,梯度稀释至#6管。
经以上操作,#1至#6管中cAMP标准品浓度分别为250,50,10,2,0.4和0.08 pmol/mL(详见cAMP实验稀释详情键盘纸)。稀释过的标准品需在30分钟内使用。
标记一只试管作为无标准品空白对照(NSB)。移取600μL 0.1M HCl到NSB管中。
2. 洗涤液
将15 mL 10×洗涤液储液加到135 mL去离子水中,稀释成工作液。稀释液可在室温保存至***盒有效期限,或者3个月。
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