常用的ELISA可以分为以下五大类:①直接ELISA;②间接ELISA;③夹心ELISA;④竞争ELISA;⑤竞争***ELISA。其他的ELISA都隶属于这五类ELISA或由这五类ELISA组合衍生。
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测定小分子量物质常用竞争法,其标准曲线中吸光度与受检物质的浓度呈负相关。标准曲线的形状因***盒所用模式的差别而略有不同。ELISA测定的标准曲线注意图中横坐标为对数关系,这更有利于测定系统的表达。
ELISA操作步骤复杂,影响反应因素较多,特别是固相载体的包被难达到各个体之间的一致,因此在定量测定中,每批测试均须用一系列不同浓度的参考标准品在相同的条件下制作标准曲线。
elisa***盒回收率是反应待测物在样品分析过程中的损失的程度,损失越少,回收率越高。
制备方法
包括以下步骤:1)抗原表位的计算机筛选;2)抗原的制备;3)***的采集;4)间接ELISA方法的建立;5)间接ELISA方法的敏***和特异性验证;6)***盒的稳定性验证;7)对屠宰场进行临床检测。
该方法简单、快速、灵敏度高、特异性强、稳定性合格、重复性好。
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