对于生长的***培养液中的细胞，首先移除培养基，然后加入0.1M HCl处理细胞。孵育10分钟并观察细胞是否被裂解；如果裂解不充分，接着孵育10分钟并观察。以大于600g离心力于室温离心，收集上清直接用于实验。临用前在0.1M HCl中加入0.1%至1%浓度的Triton-x 100可增强细胞和***裂解。在这个浓度范围内，去污剂并不干扰试验的结合部位，但是会适度的增加光密度值。含有Triton的样品需利用标准曲线估计浓度，为了较精l确的测定，标准曲线需以相同方式稀释。取1 mL细胞培养上清加入10μL浓盐酸，600g离心力于室温离心，上清液直接用于实验测定分析。

结果计算

样品中cAMP浓度有多种计算方法。X轴表示cAMP标准品浓度，Y轴表示净光密度的平均值或者百分比值。

1 样品和标准品的净光密度(OD)平均值的计算：

净OD平均值 = OD平均值 － NSB孔OD平均值

2 计算不同梯度浓度标准品的结合率占较大结合率(B0孔)的百分比，计算公式 如下：

百分比值 = (净OD平均值/ B0孔OD平均值)×100

3 绘制净OD平均值或百分比值对cAMP标准品浓度的Logit-Log曲线。通过插值即可得到样品中cAMP浓度。

线性关系

cAMP浓度为16.0pmol/mL的样品，用0.1M HCl进行连续七次1:2梯度稀释。将实际的cAMP浓度和测定的cAMP浓度绘制图表。该直线的斜率为1.000，相关系数为0.999。

交叉反应

部分相关化合物的交叉反应由竞争ELISA测定。将可能的交叉反应物溶解到***盒分析缓冲液中，浓度从500pmol/mL至500,000pmol/mL。这些样品通过乙酰化在cAMP竞争分析中被测定，通过比较样品中交叉***的实际浓度，可以计算出交叉反应，并用百分比(%)表示。

进口分装：检测范围和灵敏度不同，用量少时，可使用分装，前期是它的长久性不是很好。***盒的标准曲线较高点OD 值均在2.0±0.2，零孔的OD 值都控制在0.10以下。***盒的标准曲线相关系数R≥0.98。***盒重复性好，板内、板间变异系数均<9 %。***的组份都多给20%的富余量，确保完成48/96孔的检测，避免分次检测可能造成***量不足的情况。检测抗l体及酶结合物的稀释度合适(均为1:30), 方便试验操作者准确地做稀释工作，保证实验结果的重复性。