ELISA(酶联***吸附剂测定)一般指酶联***吸附剂测定酶联***吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,简写ELISA或ELASA)指将可溶性的抗原或***结合到polystyrene等固相载体上,利用抗原***特异性结合进行***反应的定性和定量检测方法。酶联***吸附测定(ELISA)为***学中的经典实验,本词条从定义、基本原理、分类方法、操作要点等方面对其进行了详细介绍。
常用的ELISA可以分为以下五大类:①直接ELISA;②间接ELISA;③夹心ELISA;④竞争ELISA;⑤竞争***ELISA。其他的ELISA都隶属于这五类ELISA或由这五类ELISA组合衍生。
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ELISA操作步骤复杂,影响反应因素较多。
测定大分子量物质的夹心法ELISA,标准曲线的范围一般较宽,曲线***高点的吸光度可接近2.0,绘制时常用半对数值,以检测物的浓度为横坐标,以吸光度为纵坐标,将各浓度的值逐点连接,所得曲线一般呈S形,其头、尾部曲线趋于平坦,***较呈直线的部分是***理想的检测区域。
ELISA的基础是抗原或***的固相化及抗原或***的酶标记。
***测定技术的基础在于抗原***之间的特异结合反应。以前用于***测定的抗原通常为各种纯化抗原,而***则为纯化抗原***动物后获得的多******和使用杂交瘤技术得到的单******,而抗原或***的标记物如酶标结合物则通过各种化学合成方法制备。
影响Elisa试验结果的因素很多,故加强各个环节的质量的保证才能充分发挥其方法学的优点。
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