这些抗Arf 6-GTP单克l隆抗l体还可用于通过免l疫***化学监测细胞和***中Arf 6的激l活。
NewEast Biosciences Arf6激l活测定***盒提供了一种简单且快速的方法来监测Arf 6的激l活。每个***盒均提供足够的量以执行20个测定。
NewEast Biosciences Arf 6激l活检测***盒基于特定于配置的抗Arf 6-GTP单克l隆抗l体,可从细胞提取物或体外载有GTPγS的Arf 6激l活检测方法来测量活性Arf 6-GTP水平。 简而言之,抗活性的Arf 6小鼠单克l隆抗l体将与含有Arf 6-GTP的细胞裂解液一起孵育。 然后,结合的活性Arf 6将被蛋白A / G琼脂糖拉低。 分别使用抗Arf 6兔多克l隆抗l体通过免l疫印迹分析检测沉淀的活性Arf 6。
1.刺激的和非刺激的细胞裂解液
2.蛋白酶抑l制剂
3. 4°C管摇杆或摇床
4. 0.5 M EDTA,pH8.0
5. 1 M氯化镁
6. 2倍还原SDS-PAGE样品缓冲液
7.电泳和免l疫印迹系统
8.免l疫印迹洗涤缓冲液,例如TBST(10 mM Tris-HCl,pH 7.4,0.15 M N***,0.05%
吐温20)
9.免l疫印迹封闭缓冲液(TBST包含5%脱脂奶粉或3%BSA)
10. PVDF或硝l酸纤维素膜
11.二抗
12. ECL检测***
检测原理
武汉纽斯特生物技术有限公司的Cd***2活性检测***盒主要是利用识别蛋白特异形态的Cd***2-GTP单克l隆抗l体特异性的去检测细胞提取物或者体外的(样品需要进行GTPγS活化处理)活性Cd***2-GTP的水平。简言之,特异性识别Cd***2活化构象的鼠单克l隆抗l体可以特异性结合细胞裂解液中的Cd***2-GTP活性蛋白,然后利用protein A/G将抗原抗l体的结合物吸附下来,再利用特异性识别Cd***2活化构象的兔多克l隆抗l体进行免l疫印迹分析进行检测。
分析原理
NewEast Biosciences Arl1激l活检测***盒基于配置特异性抗Arl1-GTP从细胞提取物或体外检测活性Arl1-GTP水平的单克l隆抗l体GTPγS负载Arl1活化分析。简而言之,抗活性Arl1小鼠单克l隆抗l体将用含有Arl1-GTP的细胞裂解液培养。然后,绑定的活动Arl1将被下拉蛋白质A/G琼脂糖。用抗Arl1兔多克l隆抗l体或抗Arl1小鼠单克l隆抗l体进行免l疫印迹分析,检测沉淀的活性Arl1。
需要但未提供的材料
1刺激性和非刺激性细胞裂解物
2蛋白酶***素
4°C摇管器或振动筛
40.5 M EDTA,pH8.0
51百万氯化镁
62X还原SDS-PAGE样品缓冲液
7电泳和免l疫印迹系统
8免l疫印迹洗涤缓冲液,如TBST(10 mM Tris HCl,pH 7.4,0.15 M N***,0.05%
吐温-20)
9免l疫印迹阻断缓冲液(含5%脱脂奶粉或3%牛血l清白蛋白的TBST)
10PVDF或硝化纤维膜
11次级抗l体
12ECL检测***
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