Arl3（类似Arf的3）是一种ADP-核糖基化因子（Arf）家族蛋白，在N端延伸方面不同于大多数Arf家族成员。 Arl3的核苷酸交换是快速的，并且与脂质和去污剂无关。 与GDT / GTP结合后，Arl3与一系列效应蛋白相互作用，并调节这些效应蛋白的活性，例如人类视网l膜***4（HRG4），cGMP磷酸二酯酶的δ亚基（PDEδ）和Arl2的结合物（BART）。 Arl3还以可调节的方式结合微管，以通过与色素性视网l膜炎2（RP2）相互作用来改变胞质分裂的特定方面。 有人提出，RP2与Arl3协同作用，将光感受器中的细胞膜和细胞骨架连接为细胞的一部分

9.收集上清液并在冰上存储样品（约1-2 mg总蛋白）以进行中间使用，或将其冷冻并保存在-70°C下以备将来使用。

检测原理

    武汉纽斯特生物技术有限公司的Cd***2活性检测***盒主要是利用识别蛋白特异形态的Cd***2-GTP单克l隆抗l体特异性的去检测细胞提取物或者体外的（样品需要进行GTPγS活化处理）活性Cd***2-GTP的水平。简言之，特异性识别Cd***2活化构象的鼠单克l隆抗l体可以特异性结合细胞裂解液中的Cd***2-GTP活性蛋白，然后利用protein A/G将抗原抗l体的结合物吸附下来，再利用特异性识别Cd***2活化构象的兔多克l隆抗l体进行免l疫印迹分析进行检测。

电泳和转膜

1. 取15ul样品/孔上样17%配体胶。

2. 按照制造商的说明进行SDS-PAGE。

3. 按照制造商的说明将凝胶蛋白转到PVDF或硝化纤l维素膜。

免l疫印迹反应和检测（所有步骤都是在室温下进行，并不断搅拌）

1. 将PVDF膜浸入100%甲l醇15s，然后在室温放置5 min晾干。

注意：如果使用的是硝化纤l维素膜，此步省略。

2. 封闭：用TBST缓冲液配制5%的脱脂牛奶或者3%BSA在室温下孵育1H进行封闭，并需要恒定振荡。

3. 孵育一抗：用TBST缓冲液配制的5%脱脂牛奶或3%BSA稀释特异性识别Cd***2活性构象的兔多克l隆抗l体（稀释比例为1:50-1:1000，主要根据样品中含有的Cd***2蛋白的量），室温下孵育1-2小时，或者4°C条件下过夜孵育。

4. 用TBST缓冲液洗涤膜三次/5min。

5. 孵育二抗：（例如羊抗兔IgG-HRP），用TBST缓冲液配制的5%脱脂牛奶或3%BSA按1:1000稀释比例稀释后使用，室温下孵育1小时并恒定振荡。

6. 用TBST缓冲液洗涤膜三次/5min。

7. 使用实验者所选择的检测方法进行显色如ECL显色法。

分析原理

基于构型特异性抗Gα13-GTP的NewEast生物科学Gα13活化检测***盒从细胞提取物或体外检测活性Gα13-GTP水平的单克l隆抗l体GTPγS负载Gα13活化试验。简单地说，抗活性Gα13小鼠单克l隆抗l体用含有Gα13-GTP的细胞裂解液培养。结合的活性Gα13将被蛋白质A/G琼脂糖。用兔抗α13多克l隆抗l体免l疫印迹法检测沉淀的活性Gα13。