1.抗活性Arf 6,小鼠单克l隆抗l体(货号26918):一小瓶– 22 μL(1
含50%甘油和0.05%叠氮l化钠的PBS(pH 7.4)中的浓度(mg / ml)。 该抗l体特异性识别所有脊椎动物的Arf 6-GTP。
2.蛋白A / G琼脂糖(目录号30301):一小瓶– 400 μL 50%浆液。
3. 5X测定/裂解缓冲液(目录号30302):一瓶– 30 mL的250 mM Tris-HCl,pH 8,750mM N***,50 mM MgCl2,5 mM EDTA,5%Triton X-100。
4.抗Arf 6,兔多克l隆抗l体(货号21032):一小瓶– 100 μL(1 mg / ml)
pH 7.4的PBS中含有50%的甘油。
5. 100 XGTPγS(目录号30303):1瓶– 100 μl,10 mM,使用5 μLGTPγS标记0.5 mL细胞裂解液。
6. 100 X GDP(产品目录号30304):一个样品瓶– 100 μl,100 mM,使用5 μL GDP标记0.5 mL细胞裂解物。
储存条件
***盒的成分在***盒的有效期限内必须存放于4°C条件下保存。
***(***盒内不提供,由实验者自行配置)
1. 刺激和未刺激的细胞裂解物;
2. 蛋白酶***l剂;
3. 4 °C 摇杆或者摇床;
4. 0.5 M EDTA (pH 8.0);
5. 1 M MgCl2;
6. 2X reducing SDS-PAGE sample buffer;
7. 电泳和免l疫印迹相关***;
8. 免l疫印迹缓冲液TBST (10 mM Tris-HCl, pH 7.4, 0.15 M N***, 0.05%
Tween-20);
9. 免l疫印迹封闭缓冲液 (TBST containing 5% 脱脂奶粉 or 3% BSA);
10. PVDF或硝l酸纤维素膜;
11. 二抗;
12. ECL 检测***;
GTPases的Rab家族调节真核水泡膜运输。 Rab35与两个血浆
膜和内体***,并涉及到包括T细胞受体回收,卵母细胞卵黄蛋白回收和胞质分裂在内的各种过程。 Rab35调节***元样细胞中的***突生长,并可以诱导突起。
当前没有直接测定法来测量Rab35 GTPases的活化。
NewEast Biosciences Rab35激l活检测***盒基于特定于配置的单克l隆
特异性识别Rab35 GTP而不识别Rab Rab35 GDP的抗l体。鉴于...的高度亲和力
抗原的单克l隆抗l体,可以在短时间内进行激l活测定。这个
分析提供了可靠的结果,并具有一致的可重复性。
这些抗Rab35 GTP单克l隆抗l体也可以用于监测大鼠Rab35的激l活。
1细胞和***中的免l疫***化学。
NewEast Biosciences Rab35激l活检测***盒提供了一种简单快速的方法来监测
Rab35的激l活。每个***盒均提供足够的量以执行20个测定。
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