pcr常见辅料的质检

辅料的质检应结合实际工作中可能用到的场景，并非越苛刻越好，需要每个实验室结合自身情况来设计和调整文中提到的参数。

1.离心管

（1）渗漏密闭性：将n个离心管加入半量墨汁，盖好盖子后放入水中，浸泡30min，没有墨汁渗出为合格。

（2）离心密闭性：将n个离心管加入半量纯水，放入离心机，10000 rpm，30min，管盖未崩开未漏液为合格。

（3）热密闭性：将n个离心管加入半量纯水，盖好盖子称重后放入金属浴中，65℃或90℃（巴氏消毒），30min，再进行称重，离心管未变形，管盖未崩开未漏液，前后重量未变化为合格。

（4）冷密闭性：将n个离心管加入半量纯水，放入-20℃冰箱，24h，离心管未变形，管盖未崩开未漏液为合格。

（5）污染物质检：将n个离心管分别加入半量阴性纯水，盖好盖子涡旋1 min后静置5min，吸取纯水作为模板进行扩增，qPCR无扩增为合格。

（6）***物质检：将n个离心管分别加入弱阳性质控物,室温静置5min，然后进行提取;RNA核酸，DNA核酸，室温静置5min，作为模板进行扩增，qPCR扩增未被***为合格。

pcr移液器和离心管架及离心机的内外表面

这些常见物品的外表面容易被核酸和***污染，主要查看这两个指标。

（1）表面核酸污染：用沾湿的拭子擦拭上述物品的外表面，然后浸泡到纯水中10min，吸取纯水作为模板进行扩增，qPCR无扩增为合格。

（2）移液器内腔核酸污染：对于常用的移液器的内部，可使用无滤芯的吸头在阴性纯水中吹吸10次后，吸取纯水作为模板进行扩增，qPCR无扩增为合格。

（3）表明***污染：用沾湿的无菌拭子擦拭上述物品的外表面，划琼脂平板，每个平板的菌落数不应超过一定数量（我也不确定多少合适，由于不要求无菌操作一定会有***，但是也不应该太多）。

非瘟和新冠后一下子新增了很多核酸检测实验室，早期大家关注的点都在设施和硬件上，但是一个检测实验室开展大量检测工作之后，检测中弱的环节决定检测的质量。我们也需要将精力放在检测中的每个细节上。

pcr实验室设置区域

PCR实验室应相对***，尽量避免与其他普通实验套叠或者有通道上的交叉。看过一个图，他们的PCR实验室设置在检验科的里面，医废和标本的运送要穿过检验科的整个走廊，这种情况、物流、污物均在同一个通道，风险较高，应尽量避免。

设置区域：

PCR实验室应设置以下区域：***储存和准备区、标本制备区、扩增区、扩增产物分析区。这个4个区域在物理空间上必须完全***，各区域无论是空间上还是在使用中，应当始终处于完全的分割状态，不能有空气的直接相通。根据使用仪器的功能，区域可以适当合并。每个区域间设置传递窗，要求一侧打开时另一侧无法打开。4个区域应设置***的缓冲间，应设置可以通到四个操作区域的PCR走廊，在进入各区域前，应设置更衣间，每个区域的衣服可用不同颜色进行区分，在清洁区应设置洗澡间、卫生间、值班室。还应考虑到医废和标本的运送通道。

净化车间标准操作流程大揭秘

   净化工作台实际上就是给净化车间提供局部高洁净度环境的空气净化设备。其使用对改善环境条件，提升产品质量、增加产品率具备效果。下面小编同学为大家揭秘下有关净化车间的相关标准操作流程。

   新安装或长时间未使用的设备，在使用前必须达到对净化车间不产生影响。

   在设备安装并清洁干净后对设备进行系统检测与调节，让设备达到工作状态以及使用要求。

   当电源接通后按照控制面板所提示的操作流程进行。启动紫外灯开关并让其照射30min后关闭紫外灯。启动风机开关，设备自净10min至20min后方可进行工作，工作完后后将风***闭并切断电源。使用75%酒精棉擦拭操作台面。

   在净化车间内尽量不要堆放不必要的物品，避免影响气流以及灭菌效率。

   当预过滤器表面发黑、容纳尘埃较多时，明显发现阻力加大此时应将预过滤器中的无纺布进行清洗并进行调换。

   每个月对净化车间进行检测与打扫。

   注意！

   在净化车间中工作时应尽量保持轻缓，避免***工作环境。

   风速过大会减短过滤器的使用寿命，所以使用时间应调节到合适的风速。