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PCR实验室试用剂准备和储存区:说到这里,再为大家补充些经验:1.试用剂配制室及样品处理室宜呈微正压,以防外界含核酸气溶胶的空气进入,造成污染;可以通过控制进风风量大于排风风量达到正压效果。2.核酸扩增室及产物分析室应呈微负压,以防含核酸的气溶胶扩散出去污染试用剂与样品,可以通过控制排风风量大于进风风量达到负压效果。
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⑷DNA样品应该用有专门的防护或正压活塞式移液管操作,以防止在吸取样品时有气溶胶遗留。⑸大体积样品应该用单独包装的无菌一次性移液管吸取。⑹管子打开前都要简短离心以减少气溶胶的产生,保定PCR实验室装修,而且管子不能用力崩开,这样会产生气溶胶。⑺任何时候都应该穿实验服和带手套,手套要经常更换,尤其在抽提过程中每一步之间都要更换。实验服要专门用于样品准备间,经常清洗。
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在巢式PCR测定中,通常在一轮扩增后必须打开反应管,因此巢式扩增有较高的污染***性,第二次加样必须在本区内进行。本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为负压,以避免溶胶从本区漏出。为避免气溶胶所致的污染,PCR实验室装修设计,应尽量减少在本区内的不必要的走动。个别操作如加样等应在超净台内进行。2.4扩增产物分析区:该区域主要进行的操作为扩增片段的测定。如使用全自动封闭分析仪器检测,此区域可不设。本区是尤为主要的扩增产物污染来源,因此对本区的压力梯度的要求为:相对于邻近区域为负压,以避免扩增产物从本区扩散至其它区域。
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