2. 根据一抗的种属来源和类型选择二抗

二抗应选用与使用的一抗相同的物种来源，例如：如果一抗是小鼠源的***，二抗则选抗小鼠的二抗；如果一抗是从兔***里制备的兔源***，则相应的二抗需要选择抗兔的二抗。另外，二抗需与一抗的类别或亚类相匹配。这通常是针对单******而言。其中单******的类别及亚类通常会在产品说明书中都会有描述，如果一抗是小鼠IgM，那么相应的二抗就应当是抗小鼠IgM。如果一抗是小鼠IgG的某一亚类（IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG3），那么几乎所有的抗小鼠IgG都可以与之结合，或者你也可以选择专门针对这一亚类的二抗，例如，如果你的一抗是小鼠IgG1，那么你可以选择抗IgG1的二抗。至于二抗本身是在什么动物中制备的对二抗的质量并无明显的影响。

3. 根据实验要求的特异性进一步筛选二抗

Anti-IgG (H+L)是***常用也是性价比***高的二抗形式，这类***和IgG分子的重链和轻链都可以反应，也可以和其他的***球蛋白家族（IgM，IgA，IgD,IgE）和亚家族反应，因为所有的***球蛋白都有相同的轻链。 Anti-IgG，Fc fragment specific这类***和IgG重链的Fc部分反应，与F(ab’)2或Fab无交叉反应，但可能与IgM或IgA有交叉反应；而抗IgG，Fcγ fragment specific则只与IgG重链反应，通常不能和IgA或IgM任何表位反应。 Anti-IgG，F(ab’)2 fragment specific则与Anti-IgG，Fc fragment specific则正好相反。

另外，与一个物种反应的二抗可能与其他物种发生交叉反应，除非这类***经过其他物种的***蛋白吸附实验。如Jackson 的Horseradish Peroxidase-conjugated AffiniPure Mouse Anti-Goat IgG (H+L) (min X Ms, Hu, Rb Sr Prot) 小鼠抗山羊二抗，就是经过了小鼠、人、兔***的吸附， 其与小鼠、人、兔***内蛋白（包括***球蛋白）的交叉反应降到***低。 当其他物种***球蛋白的出现可能导致交叉反应时，推荐使用这类***。