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作者:原态生物科技2020/8/20 3:11:37





PCR检测***盒反应五要素:参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2

引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,PCR快速检测, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,荧光定量PCR快速检测,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:

①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。

②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,PCR快速检测***,特定条件下可扩增长至10kb的片段。

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PCR检测***盒而荧光定量PCR有如下显著的优点:

1、特异性好,使用特异性探针对定量分子进行识别,具有很高的准确性。同时,靶序列由引物和探针双重控制,特异性好、假阳性低。 2、灵敏度高,荧光PCR检测技术是综合了PCR技术、荧光标记技术、激光技术、数码显象技术为一体的技术,因此它的检测灵敏度很高。3、线性关系好、线性范围宽,由于荧光信号的产生和每次扩增产物成一一对应的关系,通过荧光信号的检测可以直接对产物进行定量;定量范围可在0-1010拷贝/毫升。


聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)是利用一段DNA为模板,在DNA聚合酶和核苷酸底物共同参与下,将该段DNA扩增至足够数量,以便进行结构和功能分析。PCR检测方法在临床上快速诊断***chuan染病等方面具有极为重要的意义。PCR原理用于扩增位于两段已知序列之间的DNA片段,类似于天然DNA的copy过程。


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