汕尾Gemini色谱柱代理承诺守信「在线咨询」
作者:广州联方2020/10/15 4:18:28






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液相色谱柱清洗方法

gao效液相色谱是20世纪60年代后期发展起来的分离分析技术,是现代分离测定的重要手段。问世以来,因其具有分离效能高、分析速度快、检测灵敏度好、能分析高沸点但不能气化的热不稳定生理活性物质的特点而被广泛应用于生***学、及临床分析。5的范围内使用,而离子交换色谱要求有更宽的pH范围,因此其基质现在仍主要使用聚ben乙烯和二乙烯ben。gao效液相色谱柱是消耗品,会随使用时间或进样的次数增加,出现色谱峰高降低,峰宽加大或出现肩峰,柱效下降。需要定期进行彻底清洗和再生,不同的色谱柱清洗方法各不相同比如:

1、反相色谱柱

分别用jia醇:水=90:10,纯jia醇(HPLC级),异bing醇(HPLC级),二氯jia烷(HPLC级)等溶剂作为流动相,依次冲洗,每种流动相流经色谱柱不少于20倍的色谱柱体积.然后再以相反的次序冲洗。

2、正相色谱柱

分别用正己烷(HPLC级),异bing醇(HPLC级),二氯jia烷(HPLC级),jia醇(HPLC级)等溶剂做流动相,顺次冲洗,每种流动相流经色谱柱不少于20倍的柱体积(异bing醇粘度大,可降低流速,避免压力过高).注意使用溶剂的次序不要颠倒,用jia醇冲洗完后,再以相反的次序冲洗至正己烷,所有的流动相必须严格脱水。特点:更新的HPLC技术PH1-12宽广PH稳定性增强了化学稳定性,与聚合物型填料色谱柱类似保留了硅胶基质填料色谱柱的高柱效和高耐压性延长柱寿命。

3、离子交换色谱柱

长时间在缓冲溶液中使用和进样,将导致色谱柱离子交换能力下降,用稀酸缓冲溶液冲洗可以使阳离子柱再生,反之,用稀碱缓冲溶液冲洗可以使阴离子柱再生。

另外,还可以选择能溶解柱内污染物的溶剂为流动相做正方向和反方向冲洗。但再生后的色谱柱柱效是不可能***到新柱的水平的.如果柱子装反了,可以调回来,但可能会造成柱内担体塌陷.在不得已的情况下尽量不要反装色谱柱。

lux (手***谱柱)

完整的手性分离方案

从分析到制备级别,简化手性分离,均是明智的投入!

LUX手性柱和填料通过以下三种方法简化分离过程:

?独特和传统的固定相相结合,增加手性筛选的成功率

?完全兼容于正相体系、极性有机相体系、超临界流体

?色谱及反相体系的方法-无需换柱!

使用Lux?筛选工具包

可以分离92%*的对映体

现有5种独特的固定相可选择!

1.Amylose-2:独特的氯代固定相扩大了对映体选择性范围;

2.Cellulose-2:新型氯代固定相提高您手性筛选的成功率;



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如何避免液相色谱柱的损坏呢?

在gao效液相色谱的使用中,我们会发现很多实验室会面临色谱柱频繁损坏的问题。

曾经也有很多同学和我联系讨论色谱柱的清洗和再生,所以我之前写了一篇关于色谱柱的清洗欠你们的色谱柱清洗再生方法来了)。

但是转念一想,其实应该帮助大家做的事情是如何去避免色谱柱的损坏。所以,这次我们就来讨论一下色谱柱的预防吧。

损坏的来源

首先,需要来了解一下色谱柱的损坏来源于哪些方面:

泵头密封圈的磨损

进样阀转子密封圈的磨损

析出的缓冲盐

样品中的复杂易吸附基质

其实,在工作过程中大多数的颗粒物堵塞导致的色谱柱背压升高问题是体现在柱头堵塞。

而样品的易吸附机制也可能会和柱前端的硅胶表面游离的硅醇基发生作用导致色谱柱背压升高。

但是这种情况在较低的PH系统中会有所改善,因为较低的PH系统会降低硅胶表面的硅醇基发生解离。

预防措施

为了降低色谱柱的损伤问题,我建议大家在使用色谱柱时可以做一些预防。例如:

1在液相系统中加入在线过滤器

在线过滤器的内部颗粒空隙一般是0.5微米,对于UHPLC会选择0.2微米空隙的在线过滤器。这个空隙尺寸和柱头的过滤筛板尺寸接近或者略小。

不同公司的在线过滤器

所以,在线过滤器能够有效的阻隔来自样品、泵头密封垫、自动进样器的转子密封垫的颗粒物,以防止柱头过滤筛板的堵塞。

注意:但是对于非常低死体积的液相系统,在线过滤器的加入可能会导致系统死体积增大峰展宽变严重的问题。而对于大多数的液相系统而言,色谱图不会有太大变化。



LuxAMP 手性液相色谱柱

出众的可靠性

Luna 3μm AMP 填料和色谱柱均具有非常高的一致性,这使它们能够成为ben丙胺和jia基ben丙胺分析的准确分析工具。通过 LC-MS 分析ben丙胺和jia基ben丙胺对每批产品进行专门测试,经过

质量测试的色谱柱能够确保可靠性和重现性。

如果 Lux 分析柱(内径≤ 4.6mm)不能提供与具有相同粒径、类似固定相和规格的同类色谱柱至少相当或更好的手性分离效果,请在 45 天内提供对比数据并退回产品,我们将为您全额退款。




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GeminipH 灵活性强的液相色谱柱

应用

霉菌du素筛分

色谱柱: Gemini 5 μm C18

规格: 150 x 4.6mm

货号: 00F-4435-E0

流动相: A:含有 5mM yi酸铵和 1% yi酸的水/jia醇 (90:10)

B:含有 5mM yi酸铵和 1% yi酸的水/jia醇 (3:97)

流速: 1mL/min

温度: 25 °C

检测: 串联质谱仪 (MS/MS) (25 C)

检测器: SCIEX API 4000 系统

样品: 1. 林可

2. mai角新碱

3. 黄qu霉du素 G2

4. 黄qu霉du素 G1

5. 黄qu霉du素 B2

6.mai角隐亭

7. 黄qu霉du素 B1

8. mai角异卡里碱

9. 赭曲 A

10. 尼日利亚菌素

11. 氯

12. -玉米赤霉烯醇

13. 雷帕

手***谱柱的正确使用:

色谱柱是昂贵的色谱耗材,正确的使用和维护对保证色谱柱的正常使用和延长寿命至关重要。

1、色谱柱使用前注意事项:

1)、色谱柱内的存储液:

色谱柱的存储液,如没有特殊说明均为质检报告中所述流动相,氨基(NH2)、qing基(CN)、硅胶柱(SiO2)均为正相条件 – 正己烷/异bing醇体系,反相柱(C1、***、C8、C18、ben基Phenyl)均为jia醇/水体系,检测前,请用相互溶的***将其替换;球形颗粒提供较低的柱压、较高的柱效和稳定性以及较长的柱寿命在使用高粘度的活动相时。

2)、新色谱柱的平衡:

新反相色谱柱:用纯jia醇冲洗色谱柱30个柱体积,再更换成能与检测流动相互溶的流动相冲洗30个柱体积,后用流动相稳定系统至基线平稳;

新的正相色谱柱:用异bing醇0.5ml/min冲洗30个柱体积,再更换成检测流动相稳定系统至基线平稳;

2、色谱柱的使用方向:

gao效液相色谱柱标签上的箭头方向为流动相流向,使用过程时也按此方向,避免双向混用,导致两端填料同时污染,不利于色谱柱的再生和维护;

3、流动相和样品保持洁净:

由于悬浮在样品或流动相中的细小颗粒会堵塞色谱柱两端的筛板,各种***尽量使用色谱纯级的,用量少的***纯度至少是分析纯,水z好是超纯水和全玻璃器皿双蒸水,使用前建议用0.45μm的滤膜过滤;样品溶液使用针筒过滤;

样品中的杂质是造成色谱柱污染、柱效下降的主要原因之一,复杂样品可选样品预处理柱(SPE柱)进行样品处理,如果不方便处理,z好使用相匹配的保护柱,样品溶剂与流动相要相匹配,不能出现样品不互溶,极性相差太大等想象,否则会造成色谱峰形变差,鬼峰等现象,使用流动相溶解样品能有效的避免上述情况发生;但来到新公司后,发现大家都没有使用,几个实验室连保护柱都没找到一个,也就是说大家从来都没有用过。

4、色谱柱允许使用的pH范围:

每款色谱柱都有自己特定允许使用的pH范围,请仔细对照你的色谱柱的使用pH范围,在pH范围以外使用,会使硅胶基质溶解或键合相水解,对色谱柱造成不可***的损伤,如果在临界pH处使用,分析结束后立即用适合于色谱柱保存并与当前使用的流动相互溶的淋洗液置换掉。冠醚作为添加剂也用于he磁共振和电泳,但由于其毒性较大,有致ai性,使其应用受到限制。



广州联方实验器材有限公司主营:液相色谱柱,Kinetex色谱柱,Gemini色谱柱,Synergi色谱柱,Luna色谱柱等等。答:《gao效液相色谱方法及应用》于世林编著的上面说:jia醇为质子给予体、yi腈为质子接受体、四氢fu喃是偶极溶剂,应该除了极性影响,还有另外的影响因素,至于分离机理,还是比较复杂的,不能看成是个w能方法。我们不断追求,通过自身的不断完善,可以为您提供实验室和生产需要的玻璃耗材、标准物质、实验器材、色谱耗材和生物耗材,是quan面的实验室一体化采购平台。我们本着严谨、务实、创新的创业精神,为您提供价格优惠、质量保证的产品。我们有及时的送货服务,准确而快捷地满足您的需要。

Synergi Fusion-RP极性嵌入式 C18 色谱柱

均衡的极性和疏水保留可提供的选择性

疏水碱性化合物

所有色谱柱的条件:

色谱柱: Synergi 4 μm Fusion-RP

典型 C18

流动相: 20mM 磷酸钾溶液

(pH 2.5)/yi腈 (75:25)

流速: 1.0mL/min

检测: UV / 210 nm

样品: 1. 马来酸

2. 氯ben那敏

3. 曲普利啶

4. ben海拉明


手***谱柱能否用纯水冲洗?冲洗后会有什么影响?

用纯水短时间内冲洗色谱柱,通常不会对色谱柱造成较大的损伤,但如果长时间用水冲洗色谱柱则可能引起固定相流失和相塌陷现象,所以若非必要请尽量避免用纯水冲洗色谱柱,建议在水中加入一定量的jia醇或yi腈进行冲洗,通常水的含量lt;90%不会对色谱柱造成任何影响。当流动相中含有缓冲盐时,则过滤是必要的,如前所述,当缓冲溶液放置一段时间(视环境温度不同而异,夏季一般不超过48h,冬季一般不超过一周)后,在使用前还应重新过滤。

原因分析:首先,由于目前所用的色谱柱大多以硅胶为基质,硅胶的溶解特点是在纯水中的溶解度比在含有一定浓度有ji溶剂的流动相中要大得多,所以长时间的用纯水冲洗会导致固定相的流失,引起柱效下降。可选择高纯硅胶柱(高纯硅胶缺少金属杂质,且硅胶端基封尾)或一些经过修饰的C18柱(如极性嵌入技术或碱去活技术等),他们都会减少碱性化合物的拖尾,一般会选择中性或偏碱的条件下做,因为这样可增加碱性样品的保留4。其次,对于常规的 C18 柱而言,由于C18 长链与水是不互溶的,C18 长链之间的相互作用力大于C18 与水分子的作用力,长时间的用水冲洗,使得C18 长链之间相互靠近,水流的冲刷,导致相互联结的C18 长链倒伏在硅胶基质的表面,对疏水性物质的保留能力下降,即相塌陷。针对用纯水冲洗容易出现相塌陷的现象,有些厂家推出了纯水柱,这种纯水柱可以用纯水作流动相而不会产生相塌陷,这对只溶于纯水的样品的分析提供了一个很好的选择。



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