广州联方实验器材有限公司主营:液相色谱柱,Kinetex色谱柱,Gemini色谱柱,Synergi色谱柱,Luna色谱柱等等。我们不断追求,通过自身的不断完善,可以为您提供实验室和生产需要的玻璃耗材、标准物质、实验器材、色谱耗材和生物耗材,是quan面的实验室一体化采购平台。我们本着严谨、务实、创新的创业精神,为您提供价格优惠、质量保证的产品。就可以选择C18在100%酸性水溶液条件下检测,即要选择承受100%纯水且对极性化合物保留很好的色谱柱2。我们有及时的送货服务,准确而快捷地满足您的需要。
如何避免液相色谱柱的损坏呢?
在gao效液相色谱的使用中,我们会发现很多实验室会面临色谱柱频繁损坏的问题。
曾经也有很多同学和我联系讨论色谱柱的清洗和再生,所以我之前写了一篇关于色谱柱的清洗欠你们的色谱柱清洗再生方法来了)。
但是转念一想,其实应该帮助大家做的事情是如何去避免色谱柱的损坏。所以,这次我们就来讨论一下色谱柱的预防吧。
损坏的来源
首先,需要来了解一下色谱柱的损坏来源于哪些方面:
泵头密封圈的磨损
进样阀转子密封圈的磨损
析出的缓冲盐
样品中的复杂易吸附基质
其实,在工作过程中大多数的颗粒物堵塞导致的色谱柱背压升高问题是体现在柱头堵塞。
而样品的易吸附机制也可能会和柱前端的硅胶表面游离的硅醇基发生作用导致色谱柱背压升高。
但是这种情况在较低的PH系统中会有所改善,因为较低的PH系统会降低硅胶表面的硅醇基发生解离。
预防措施
为了降低色谱柱的损伤问题,我建议大家在使用色谱柱时可以做一些预防。例如:
1在液相系统中加入在线过滤器
在线过滤器的内部颗粒空隙一般是0.5微米,对于UHPLC会选择0.2微米空隙的在线过滤器。这个空隙尺寸和柱头的过滤筛板尺寸接近或者略小。
不同公司的在线过滤器
所以,在线过滤器能够有效的阻隔来自样品、泵头密封垫、自动进样器的转子密封垫的颗粒物,以防止柱头过滤筛板的堵塞。
注意:但是对于非常低死体积的液相系统,在线过滤器的加入可能会导致系统死体积增大峰展宽变严重的问题。而对于大多数的液相系统而言,色谱图不会有太大变化。
LuxAMP 手性液相色谱柱
出众的可靠性
Luna 3μm AMP 填料和色谱柱均具有非常高的一致性,这使它们能够成为ben丙胺和jia基ben丙胺分析的准确分析工具。通过 LC-MS 分析ben丙胺和jia基ben丙胺对每批产品进行专门测试,经过
质量测试的色谱柱能够确保可靠性和重现性。
如果 Lux 分析柱(内径≤ 4.6mm)不能提供与具有相同粒径、类似固定相和规格的同类色谱柱至少相当或更好的手性分离效果,请在 45 天内提供对比数据并退回产品,我们将为您全额退款。
广州联方实验器材有限公司主营:液相色谱柱,Kinetex色谱柱,Gemini色谱柱,Synergi色谱柱,Luna色谱柱等等。我们不断追求,通过自身的不断完善,可以为您提供实验室和生产需要的玻璃耗材、标准物质、实验器材、色谱耗材和生物耗材,是quan面的实验室一体化采购平台。我们本着严谨、务实、创新的创业精神,为您提供价格优惠、质量保证的产品。粒径------------平均颗粒直径,通常3-10micro。我们有及时的送货服务,准确而快捷地满足您的需要。
GeminipH 灵活性强的液相色谱柱
*** B3
色谱柱: Gemini 3 μm C18
规格: 100 x 4.6mm
货号: 00D-4439-E0
流动相: A:0.1% 甲酸的水溶液
B:jia醇
流速: 0.6mL/min
温度: 22 °C
检测: 电喷雾质谱 (E***S) (22 °C)
检测器: SCIEX API 4000 系统
样品: 1. 烟酰胺
2. 烟酸
TMP 和硫胺
色谱柱: Gemini 3 μm NX-C18
规格: 100 x 3.0mm
货号: 00D-4453-Y0
流动相: A:含 10% jia醇的 25mM Na2
HPO4
(pH 7.0)
B:含 70% jia醇的 25mM Na2
流速: 0.75mL/min
检测: 荧光(激发:375 nm,发射:435 nm)(室温)
样品: 1. TMP
2. 硫胺
手***谱柱
蛋白质型:
蛋白质型手***谱柱属于第5种类型。分离依赖于疏水相互作用和极性相互作用。已经有多种蛋白质用于此类手***谱柱。填料方法的前三种都是湿法吗,能不能对四种填充方法做一个简短的说明。目前使用较多的是α-酸性糖蛋白(α-Acid Glycoprotein,AGP),人xue清白蛋白(Human Serum Albumin,HSA),牛xue清白蛋白(Bovine Serum Albumin,BSA)和卵类粘蛋白(Ovomucoid,OV)。
α-酸性糖蛋白分子由181个氨基酸残基和40个唾液酸(sialic acid)残基构成。α-酸性糖蛋白分子偏酸性,等电点为2.7。含有两个二硫键,性质很稳定。α-酸性糖蛋白分子可以共价键合到硅胶上,制成手***谱柱,可以分离许多化合物。
α-酸性糖蛋白手***谱柱使用的流动相通常为pH 4-7的磷酸盐缓冲液和很小比例的有机相。有机相shou选异bing醇,如达不到分离要求,可以尝试yi腈,乙醇,jia醇或四氢fu喃。有机相的改变导致蛋白结构发生暂时的改变。色谱柱的负载量至关重要,典型的负载量为0.02mg/ml的浓度样品,进样20μl。D含碳量含碳量指的是硅胶表面键合相的比例,与比表面积和键合覆盖度等有关。pH 的改变对手性选择性起关键作用,尤其是胺类化合物。pH降低导致蛋白质负电荷的降低,引起胺类化合物保留时间减小,然而这意味着可以减小有机相比例,使选择性增加,峰形改善。
通过调节有机相比例仍无法达到分离效果时,有时需用电荷调节剂。但这可能引起蛋白结构的yong久改变,这些电荷调节剂包括丁酸、辛酸、癸酸和二jia基辛胺。有时也用到1,2 亚二醇,1,2丁醇和氯化钠。gao效液相色谱柱的正确使用包含:加装保护柱,过滤流动相和样品,净化样品,避免过高的柱压,注意温度和酸碱度,正确及时的冲洗等。温度对分离也有影响,温度增加保留时间,减小分离因子。
人xue清白蛋白(HSA)分子量为69,000,等电点为4.8。蛋白中认为存在两个结合位点:华法令-氮杂普鲁帕宗(warfarin-azapropazone)结合位点。流动相中加入辛酸,采用人xue清白蛋白手***谱柱可以有效分离benzodiazapine。使用更短的Kinetex色谱柱显著提升现有方法的生产率和性能,同时减少溶剂消耗。Warfarin也用人xue清白蛋白手***谱柱得到了分离,流动相组成为:100mM磷酸缓冲液pH7:yi腈:异bing醇 = 84:10:6。
牛xue清白蛋白(BSA)为球型蛋白,分子量为66,000,等电点为4.7。此蛋白为一个单氨基酸链,通过17个二硫键形成9个双环。许多化合物通过牛xue清白蛋白手***谱柱得到分离。多糖类手性柱,涂覆型三(3,5-二甲ben基氨基甲酸酯)纤维素手***谱柱(COD柱),适用于sheng物碱、β-受体拮抗剂、胺等化合物的拆分。牛xue清白蛋白不如α-酸性糖蛋白稳定,一些有ji溶剂(如yi腈、jia醇)可使蛋白变性,因此使用起来要特别注意。
卵类粘蛋白由蛋清中提取,分子量为55,000。它可分离大量的胺类和酸类化合物。
蛋白手***谱柱的载样量均较小。影响了蛋白手***谱柱在制备色谱中的应用。
蛋白手***谱柱在所有手***谱柱中是应用广的色谱柱,但并不是效果z好的色谱柱。
广州联方实验器材有限公司主营:液相色谱柱,Kinetex色谱柱,Gemini色谱柱,Synergi色谱柱,Luna色谱柱等等。我们不断追求,通过自身的不断完善,可以为您提供实验室和生产需要的玻璃耗材、标准物质、实验器材、色谱耗材和生物耗材,是quan面的实验室一体化采购平台。我们本着严谨、务实、创新的创业精神,为您提供价格优惠、质量保证的产品。答:应该这样说,加上保护柱,肯定有利于保护色谱柱不受一些颗粒物质的堵塞,肯定***于分离度和柱效,因为保护柱中间有着死体积的存在。我们有及时的送货服务,准确而快捷地满足您的需要。
Synergi选择性液相色谱柱
筛分多组分化合物的能力好
色谱柱: Synergi 2.5 μm Fusion-RP 100 ?
规格: 50 x 2.0mm
货号: 00B-4423-B0
流动相: A:水/jia醇 (90:10) 5mM 甲酸铵
B:jia醇/水 (90:10) 5mM 甲酸铵
流速: 400 μL/min
温度: 40 °C
检测: 串联质谱仪 (MS/MS) (400 °C)
样品瓶: AR0-9925-13
过滤器: AF0-8203-52
检测器: AB SCIEX API 3200? 系统
样品: 植物来源的食品中的多种残留物筛分
手***谱柱常见问题
手***谱柱也是实验室一种常用的色谱配件,手***谱柱是由具有光学活性的单体,固定在硅胶或其它聚合物上制成手性固定相。那么我们在使用手***谱柱的时候,难免会遇见各种各样的问题,下面给看看手***谱柱常见的有那些问题,怎么解决这些问题?
1、正相手***谱柱柱压高
手性柱压力高的原因有可能是流动相中醇的含量太高,或者液相流路中有堵塞,或者柱头有样品析出,或者填料被压缩柱头塌陷等。针对不同的原因请有针对性的采取相应的措施。如果是流动相中醇含量太高,则需要升高温度或者降低流速。如果液相流路中有堵塞需要排除堵塞。不封端键合相相对封端键合相会产生不同的选择性,尤其是极性样品。如果柱头有样品析出则需要使用流动相溶解样品以及样品预处理除掉样品中易析出的成分。如果填料被高压压缩柱头塌陷,则需要重新购买新的手性柱。
2、手***谱柱谱图中异构体的分离度下降
分离度下降的原因有可能是色谱柱以外的色谱条件发生了变化,或者色谱柱受损柱效发生了变化。首先查看是否是因为温度、流动相成分等外在因素发生了变化导致分离度下降,如果排除了各种外在因素就有可能是分析柱本身的柱效下降导致的。如果分离度在短时间内急剧下降伴随柱压上升,可能是有强极性溶剂损害了柱子;如果分离度在长时间内慢慢下降,可能是柱头受污染或柱头塌陷,需要更换保护柱或者更换分析柱。硅胶基质-pH2-8------------------高或低pH下,硅胶会溶解2。
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