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在real-time Q-PCR技术中，无论是相对定量还是标准曲线定量方法仍存在一些PCR定量方法均有的问题有待解决。在标准曲线定量中，标准品的制备是一个必不可少的过程。目前由于无一统一标准，各个实验室所用的生成标准曲线的样品各不相同，致使实验结果缺乏可比性。此外，用real-time Q-PCR来研究mRNA时，受到不同RNA样本存在不同的逆转录（RT）效率的限制。在相对定量中，其前提是假设内源控制物不受实验条件的影响的，合理地选择合适的不受实验条件影响的内源控制物也是实验结果可靠与否的关键。环境监测在人类食品和宠物食品行业已经成为常规举措，可以帮助人们发现生物安全计划中的薄弱环节。

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与传统的PCR技术相比，Real-time Q-PCR的不足之处是：（1）由于运用了封闭的检测，减少了扩增后电泳的检测步骤，因此也就不能监测扩增产物的大小；（2）因为荧光素种类以及检测光源的局限性，从而相对地限制了real-time Q-PCR的复合式（multiplex）检测的应用能力；满足实验目的的荧光化学物质包括DNA结合染料和荧光标记的序列特异引物或探针。（3）目前real-time Q-PCR实验成本比较高，从而也限制了其广泛的应用。

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非洲病毒的附着力到底有多强？01℃的定量PCR仪，而该公司新近推出的Rotor-Gene6000更可达到±0。直接接触或者携带病毒的物品再次传播的能力有多强？尚不清晰。目前已知非洲是高度接触性传播的急性、烈性i病毒，主要通过接触或采食受非洲病毒污染的物品，以及通过昆虫吸血而传i染。短距离可经空气传播、污染的饲料、泔水、剩菜及肉屑、栏舍、车辆、器具和衣服等均可间接传播本病。而且目前公认ASFV对外界的抵抗力强，在自然条件下可以长时间保持感i染性，可以在血液、粪便和各种***中长期保持感i染性。含有病毒的血液是该病发生传播的重要因素。

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非洲（African Swine Fever，ASF）是由非洲病毒（African Swine Fever Virus，ASFV）引起的一种急性、烈性、高度接触性传i染病，致死率100%。自2018年8月宁省沈阳市发生第i一起非洲i疫情起，目前***已有29个省115个地方发生非洲i疫情，已扑杀数百万头生猪，直接经济损失数百亿元。目前全世界都没有有效的非洲i疫i苗进行预防，现在有效的防控方法仍然是对非洲病毒进行检测，根据检测结果，对发生疫情的地方严防死守，对疫点地区生猪全部扑杀，进行无害化处理，防止疫情的扩散。自动化操作提高了工作效率，反应快速、重复性好、灵敏度高、特异性强、结果清晰。

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随着定量PCR仪设计上的不断改进，对温度控制的精密性越来越高，出现了像Rotor-Gene这样的管间温度均一性达±0.01℃的定量PCR仪，而该公司新近推出的Rotor-Gene6000更可达到±0.02℃的温度分辨率。温度上的高分辨率使得运用定量PCR仪进行高分辨率熔解曲线（HRM）分析***型成为可能。高分辨率熔解曲线根据序列长度、GC含量和互补性分析样品。不同的核酸序列，哪怕仅有一个碱基的差异，也会体现在熔解温度的差别上。广州劢博--冷冻食品加工企业/公司/厂核酸提取纯化QF-PCR技术在国外已有较广泛的应用，但目前尚未在国内产前诊断临床中普遍开展。

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PCR是1985年开始出现的一项***检测技术,由于PCR技术具有简便易行、灵敏度高等优点,该技术被广泛应用于基础研究,成为分子生物学必不可少的研究工具。但在许多情况下,研究者们已不再满足于得知某一特异DNA序列的存在与否,他们更着眼于对其进行精i确的核酸定量。因而,借助PCR对***快速、敏感、特异而准确的定量成为目前分子生物学技术研究的热点之一。实时荧光定量PCR( real-time quantitative PCR, RQ PCR)技术实现了PCR从定性到定量的飞跃,它以其特异性强、灵敏度高、重复性好、定量准确、速度快、全封闭反应等优点成为分子生物学研究中的重要工具。因为八联管你需要盖上盖子，而且盖子比较的难按下去，稍不慎就把八联管弄断或者液体撒出来。

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传统的PCR定量是应用终点PCR来对样品中的模板量进行定量,通常用凝胶电泳分离,并用荧光染色来检测PCR反应的终扩增产物。但在PCR反应中,由于模板、***、焦磷酸盐分子的聚集等因素影响聚合酶反应,终导致PCR反应不再以指数形式进行而进入“平台期”,而且一些反应的终产物比另一些要多,因此终点PCR反应方法定量并不准确。此外,终点PCR还容易交叉污染,产生假阳性。广州劢博--屠宰场荧光定量PCR磁珠法核酸提取，具有传统DNA提取方法无法比拟的优势，主要体现在：①能够实现自动化、大批量操作，符合生物学高通量的操作要求，使得传i染性***爆发时能够进行快速及时的应对，这一特点使得传统方法望尘莫及。

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核酸提取仪原理是，经裂解液裂解后，细胞核中会释放出核酸分子，会被吸附在磁珠表面，而蛋白质等物质不会被吸附，结合了核酸的磁珠被磁性物质固定在管壁上转移到洗脱管中，经过反复洗脱，后我们可以得到纯净的DNA。根据其使用范围可以分为两类，一种是大型核酸提取仪，另一种是小型核酸提取仪；另外，荧光定量PCR的结果无需通过琼脂糖凝胶电泳来评估，大大节省实验时间，提高实验效率。主要是利用磁珠纯化核酸及蛋白质从而达到提取核酸的目的，在细胞、动植物***等研究方面，一个样品用一个探针，有效防止样品之间的交叉污染。