广州劢博仪器有限公司产品服务包括:非洲病毒检测、核酸提取纯化、PCR、荧光定量PCR、检测、非洲检测、全自动核酸提取纯化系统、病毒核酸提取系统、非洲病毒快速检测***盒。这两个发现的结合以及相应的仪器和***的商品化发展导致real-timeQ-PCR方法在研究工作中的运用。我们的客户对象是食品企业/公司/厂、食品加工企业/公司/厂、冷冻食品加工企业/公司/厂、养殖场、养猪场、屠宰场、生猪屠宰场。
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在real-time Q-PCR技术中,无论是相对定量还是标准曲线定量方法仍存在一些PCR定量方法均有的问题有待解决。相对定量分析以实时PCR方式执行,在实时PCR分析过程中,PCR***扩增一直在监控中,在PCR进行期间进行数据采集,而不是在PCR结束时(终点PCR)才获取数据。在标准曲线定量中,标准品的制备是一个必不可少的过程。目前由于无一统一标准,各个实验室所用的生成标准曲线的样品各不相同,致使实验结果缺乏可比性。此外,用real-time Q-PCR来研究mRNA时,受到不同RNA样本存在不同的逆转录(RT)效率的限制。在相对定量中,其前提是假设内源控制物不受实验条件的影响的,合理地选择合适的不受实验条件影响的内源控制物也是实验结果可靠与否的关键。
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与传统的PCR技术相比,Real-time Q-PCR的不足之处是:(1)由于运用了封闭的检测,减少了扩增后电泳的检测步骤,因此也就不能监测扩增产物的大小;(2)因为荧光素种类以及检测光源的局限性,从而相对地限制了real-time Q-PCR的复合式(multiplex)检测的应用能力;(3)目前real-time Q-PCR实验成本比较高,从而也限制了其广泛的应用。(2)因为荧光素种类以及检测光源的局限性,从而相对地限制了real-timeQ-PCR的复合式(multiplex)检测的应用能力。
广州劢博仪器有限公司产品服务包括:非洲病毒检测、核酸提取纯化、PCR、荧光定量PCR、检测、非洲检测、全自动核酸提取纯化系统、病毒核酸提取系统、非洲病毒快速检测***盒。主要是利用磁珠纯化核酸及蛋白质从而达到提取核酸的目的,在细胞、动植物***等研究方面,一个样品用一个探针,有效防止样品之间的交叉污染。我们的客户对象是食品企业/公司/厂、食品加工企业/公司/厂、冷冻食品加工企业/公司/厂、养殖场、养猪场、屠宰场、生猪屠宰场。
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PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。根据检测结果,对发生疫情的地方严防死守,对疫点地区生猪全部扑杀,进行无害化处理,防止疫情的扩散。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;刚开始时, 探针结合在DNA任意一条单链上;PCR扩增时,Taq酶的5’端-3’端外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。
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实时荧光定量PCR的出现,极大地简化了定量检测的过程,而且真正实现了绝i对定量。另外,荧光定量PCR的结果无需通过琼脂糖凝胶电泳来评估,大大节省实验时间,提高实验效率。多种检测系统的出现,使实验的选择性更强。自动化操作提高了工作效率,反应快速、重复性好、灵敏度高、特异性强、结果清晰。随着生物芯片技术和荧光探针定量技术的结合,荧光定量PCR在***检测及其他各个领域中的应用前景将更加广阔,令人欣喜。尽管如此我们也应清晰认识到,FQ-PCR技术在我国各个研究领域的应用并不多见,这就需要我国学者迎头赶上,使FQ-PCR技术更充分地i推广,以推动研究工作的快速发展。
广州劢博仪器有限公司产品服务包括:非洲病毒检测、核酸提取纯化、PCR、荧光定量PCR、检测、非洲检测、全自动核酸提取纯化系统、病毒核酸提取系统、非洲病毒快速检测***盒。目前在real-timeQ-PCR中***广泛使用的TaqMan系统就是运用了这个原理。我们的客户对象是食品企业/公司/厂、食品加工企业/公司/厂、冷冻食品加工企业/公司/厂、养殖场、养猪场、屠宰场、生猪屠宰场。
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非洲病毒的附着力到底有多强?直接接触或者携带病毒的物品再次传播的能力有多强?尚不清晰。猪场一线需要快速检测技术以尽早确诊,做到早处理、早隔离,但要明确的是,猪场只需要通过合适的检测工具,帮助“定性”即可,不需要深入定量分析,有问题直接捕杀无害化处理。目前已知非洲是高度接触性传播的急性、烈性i病毒,主要通过接触或采食受非洲病毒污染的物品,以及通过昆虫吸血而传i染。短距离可经空气传播、污染的饲料、泔水、剩菜及肉屑、栏舍、车辆、器具和衣服等均可间接传播本病。而且目前公认ASFV对外界的抵抗力强,在自然条件下可以长时间保持感i染性,可以在血液、粪便和各种***中长期保持感i染性。含有病毒的血液是该病发生传播的重要因素。
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非洲(African Swine Fever,ASF)是由非洲病毒(African Swine Fever Virus,ASFV)引起的一种急性、烈性、高度接触性传i染病,致死率100%。其原理:随着PCR反应的进行,PCR反应产物不断累计,荧光信号强度也等比例增加。自2018年8月宁省沈阳市发生第i一起非洲i疫情起,目前***已有29个省115个地方发生非洲i疫情,已扑杀数百万头生猪,直接经济损失数百亿元。目前全世界都没有有效的非洲i疫i苗进行预防,现在有效的防控方法仍然是对非洲病毒进行检测,根据检测结果,对发生疫情的地方严防死守,对疫点地区生猪全部扑杀,进行无害化处理,防止疫情的扩散。
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