广州劢博仪器有限公司产品服务包括:非洲病毒检测、核酸提取纯化、PCR、荧光定量PCR、检测、非洲检测、全自动核酸提取纯化系统、病毒核酸提取系统、非洲病毒快速检测***盒。我们的客户对象是食品企业/公司/厂、食品加工企业/公司/厂、冷冻食品加工企业/公司/厂、养殖场、养猪场、屠宰场、生猪屠宰场。而荧光定量PCR可以在反应进行过程中进行累积扩增产物的分析和检测,即“实时”。
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据介绍,该发明公开了一种非洲病毒 CP530R ***的荧光 PCR 检测***及其制备方法与用途,设计合成了一套特异性的引物及 Taqman 探针和阳性对照,并利用该引物及探针建立了一种快速简便、特异性强、灵敏度高的荧光 PCR 检测体系,可在 3~4 小时内从被检样本中快速、准确、特异、安全、简便地检出 ASFV CP530R ***,可用于来自家猪、和软蜱的各种样本中微量非洲病毒CP530R ***的检测。猪群一旦出现不吃料、减料、轻微发热等疑似发病症状,可立即采集猪的唾液、肛肠拭子等混检,有助于疫情的提早发现。
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非洲 ( ASF ) 是由非洲病毒 ( ASFV ) 引起猪的一种急性、热性、高度接触性传i染病。从 20 世纪 60 和 70 年代i开始 ASF 由非洲蔓延至欧美地区,2007 年格鲁吉亚、亚美尼亚、阿塞拜疆和俄罗斯都出现了大面积流行,2018年8月也开始在我国快速蔓延开来,对我国养猪业的持续稳定发展构成巨大威胁。因此,本方法为快速诊断非洲病毒,提供了有力的技术手段。广州劢博--养殖场荧光定量PCR相对常规PCR而言,荧光定量PCR的主要优点是准确地确定初始模板拷贝数和宽的动态范围内和高的灵敏度。
广州劢博仪器有限公司产品服务包括:非洲病毒检测、核酸提取纯化、PCR、荧光定量PCR、检测、非洲检测、全自动核酸提取纯化系统、病毒核酸提取系统、非洲病毒快速检测***盒。我们的客户对象是食品企业/公司/厂、食品加工企业/公司/厂、冷冻食品加工企业/公司/厂、养殖场、养猪场、屠宰场、生猪屠宰场。广州劢博--冷冻食品加工企业/公司/厂核酸提取纯化一般而言,荧光扩增曲线可以分成三个阶段:荧光背景信号阶段,荧光信号指数扩增阶段和平台期。
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在real-time Q-PCR技术中,无论是相对定量还是标准曲线定量方法仍存在一些PCR定量方法均有的问题有待解决。在标准曲线定量中,标准品的制备是一个必不可少的过程。目前由于无一统一标准,各个实验室所用的生成标准曲线的样品各不相同,致使实验结果缺乏可比性。此外,用real-time Q-PCR来研究mRNA时,受到不同RNA样本存在不同的逆转录(RT)效率的限制。根据应对流行性腹泻病毒的经验,在不影响动物性能和饲料成本的情况下,替换原料的可行性使得很多生产者不再使用猪源原料。在相对定量中,其前提是假设内源控制物不受实验条件的影响的,合理地选择合适的不受实验条件影响的内源控制物也是实验结果可靠与否的关键。
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与传统的PCR技术相比,Real-time Q-PCR的不足之处是:(1)由于运用了封闭的检测,减少了扩增后电泳的检测步骤,因此也就不能监测扩增产物的大小;(2)因为荧光素种类以及检测光源的局限性,从而相对地限制了real-time Q-PCR的复合式(multiplex)检测的应用能力;有人讲过普通PCR后,通过电泳也可以进行定量,其实是将PCR产物的定量与PCR样本中模板定量相混了。(3)目前real-time Q-PCR实验成本比较高,从而也限制了其广泛的应用。
广州劢博仪器有限公司产品服务包括:非洲病毒检测、核酸提取纯化、PCR、荧光定量PCR、检测、非洲检测、全自动核酸提取纯化系统、病毒核酸提取系统、非洲病毒快速检测***盒。我们的客户对象是食品企业/公司/厂、食品加工企业/公司/厂、冷冻食品加工企业/公司/厂、养殖场、养猪场、屠宰场、生猪屠宰场。如采用常规的终点检测法(利用EB染色来判断扩增产物的多少,从而间接的判断起始拷贝量),即使起始模板量相同经PCR扩增、EB染色后也完全有可能得到不同的终点荧光信号强度。
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一、充分认识养殖环节非洲排查的重要意义。强化养殖环节非洲排查,是当前疫情防控的关键措施,是及时发现和消除风险的重要手段,有利于非洲i疫情“早发现、早报告、早处置”,有利于降低运输、屠宰、生产加工等下游环节疫情传播风险。二、鼓励规模猪场和种猪场开展非洲自检。鼓励规模猪场、种猪场配置检测仪器设备,规范使用经我部批准或经中国动物疫病预防控制中心比对符合要求的检测方法,自行开展非洲检测。注意:这里说的时间,不单纯是消毒所用的时间,更重要的是病原体与消毒i药接触的有效时间。
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临床上非洲真正感i染方式往往是通过猪与猪、猪与环境等直接接触感i染非洲,即自然感i染。自然感i染实验结果显示,非洲自然感i染情况下,唾液可以早于血液3~20天检测出非瘟病毒,便于早期筛查!。猪群一旦出现不吃料、减料、轻微发热等疑似发病症状,可立即采集猪的唾液、肛肠拭子等混检,有助于疫情的提早发现。如果在血液中检测到了非洲病毒,说明猪场很有可能已经较大面积感i染非洲病毒。广州劢博--屠宰场核酸提取纯化一般情况下,高温消毒时,60℃就可以将多数病原杀灭,但汽i油喷灯温度达几百度,喷灯火焰一扫而过,也不会杀灭病原,因时间太短。
广州劢博仪器有限公司产品服务包括:非洲病毒检测、核酸提取纯化、PCR、荧光定量PCR、检测、非洲检测、全自动核酸提取纯化系统、病毒核酸提取系统、非洲病毒快速检测***盒。我们的客户对象是食品企业/公司/厂、食品加工企业/公司/厂、冷冻食品加工企业/公司/厂、养殖场、养猪场、屠宰场、生猪屠宰场。但在PCR反应中,由于模板、***、焦磷酸盐分子的聚集等因素影响聚合酶反应,***终导致PCR反应不再以指数形式进行而进入“平台期”,而且一些反应的终产物比另一些要多,因此终点PCR反应方法定量并不准确。
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非洲为何难以控制?因为病原体往往附着于其他物质上面或中间,消毒i药与病原接触需要先渗透,而渗透则需要时间,有时时间会很长。非洲病毒***组全长 170~190 kb,为有囊膜的双链 DNA 病毒,病毒粒子大小为 175~215 nm,呈正二十面体结构,也是唯i一的虫媒DNA病毒。非洲病毒是一种急性、热性、高度接触性传i染病,引起猪的死i亡率可达100%,并且非洲具有潜伏期,即使感i染病毒,但没有临床症状,就有可能通过非实验室检验技术关卡流入市场,进而导致下游食品企业相关问题的出现。
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非洲与传统相似且综合症状复杂难辨,临床上类似于急性,表现为高热、皮肤充血、流i产、水肿和脏器出血。我国因之前不属于非洲i疫情***,因此没有相关的针对性研究,目前采用的是原农i业部检疫所于1997年与美国梅岛动物病研究所共同研究的检测方法,主要是PCR和ELISA,标准遵循GB/T 18648-2002非洲诊断技术。随着相关检测技术的发展,对于非洲的检测方法也更加完善。PCR技术是目前i简单、快速的分子学检测方法,但该方法的敏***有限,因此以PCR为基础的更新方法应运而生。在实时PCR中,反应是在目标的扩增***早被监测到时用循环中的时间点来描述的,而不是在PCR结束时通过目标的累计数来描述。
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