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一般猪场而言，只需配备非洲快速检测试纸条，根据猪场规模配备10-50条即可，场里有异常波动，就可以及时现场检测。一定注意取样方法及注意事项，注意消毒。如果不幸检测到疑是非洲阳性的样本，建议再反复多卡检测看看，基本上可以做到百i分百准确率。要是不放心，再送检相关部分去做PCR检测。实时荧光定量PCR技术于1996年由美国AppliedBiosystems公司推出，由于该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃，而且与常规PCR相比，它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点。猪场一线需要快速检测技术以尽早确诊，做到早处理、早隔离，但要明确的是，猪场只需要通过合适的检测工具，帮助“定性”即可，不需要深入定量分析，有问题直接捕杀无害化处理。

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磁珠法核酸提取，具有传统DNA提取方法无法比拟的优势，主要体现在：①能够实现自动化、大批量操作，符合生物学高通量的操作要求，使得传i染性***爆发时能够进行快速及时的应对，这一特点使得传统方法望尘莫及；②操作简单、用时短，整个提取流程只有四步，大多可以在36-40分钟内完成；另外，荧光定量PCR的结果无需通过琼脂糖凝胶电泳来评估，大大节省实验时间，提高实验效率。③安全***，不使用传统方法中的氯i仿等******，对实验操作人员的伤害减少到少，完全符合现代环保理念；④磁珠与核酸的特异性结合使得提取的核酸纯度高、浓度大。

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相对定量可以对每个样本中模版的其实水平之间的差异进行精i确比较，没必要知道模版的确切拷贝数，并且样本模板中的相对水平不用使用标准曲线就可以确定。相对定量分析以实时PCR方式执行，在实时PCR分析过程中，PCR***扩增一直在监控中，在PCR进行期间进行数据采集，而不是在PCR结束时（终点PCR）才获取数据。猪群一旦出现不吃料、减料、轻微发热等疑似发病症状，可立即采集猪的唾液、肛肠拭子等混检，有助于疫情的提早发现。在实时PCR中，反应是在目标的扩增早被监测到时用循环中的时间点来描述的，而不是在PCR结束时通过目标的累计数来描述。

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在PCR反应体系中，加入过量SYBR荧光染料，SYBR荧光染料非特异性地掺入DNA双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。SYBR仅与双链DNA进行结合，因此可以通过溶解曲线，确定PCR反应是否特异。还有，由于PCR反应和检测都在反应管中进行，样品污染的几率大大降低，无需扩增后的实验操作。

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随着定量PCR仪设计上的不断改进，对温度控制的精密性越来越高，出现了像Rotor-Gene这样的管间温度均一性达±0.01℃的定量PCR仪，而该公司新近推出的Rotor-Gene6000更可达到±0.02℃的温度分辨率。温度上的高分辨率使得运用定量PCR仪进行高分辨率熔解曲线（HRM）分析***型成为可能。高分辨率熔解曲线根据序列长度、GC含量和互补性分析样品。但在实际的PCR反应过程中，随着反应的进行由于体系中各成分的消耗（主要是由于聚合酶活力的衰减）使得靶序列并非按指数方式扩增，而是按线性的方式增长进入平台期。不同的核酸序列，哪怕仅有一个碱基的差异，也会体现在熔解温度的差别上。

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PCR是1985年开始出现的一项***检测技术,由于PCR技术具有简便易行、灵敏度高等优点,该技术被广泛应用于基础研究,成为分子生物学必不可少的研究工具。但在许多情况下,研究者们已不再满足于得知某一特异DNA序列的存在与否,他们更着眼于对其进行精i确的核酸定量。因而,借助PCR对***快速、敏感、特异而准确的定量成为目前分子生物学技术研究的热点之一。（2）此后荧光双标记探针的运用使在一密闭的反应管中能实时地监测反应全过程。实时荧光定量PCR( real-time quantitative PCR, RQ PCR)技术实现了PCR从定性到定量的飞跃,它以其特异性强、灵敏度高、重复性好、定量准确、速度快、全封闭反应等优点成为分子生物学研究中的重要工具。