生猪屠宰场非洲猪瘟病毒检测择优推荐 广州劢博仪器
作者:劢博仪器2020/4/17 12:25:58





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据介绍,该发明公开了一种非洲猪瘟病毒 CP530R 基因的荧光 PCR 检测试剂及其制备方法与用途,设计合成了一套特异性的引物及 Taqman 探针和阳性对照,并利用该引物及探针建立了一种快速简便、特异性强、灵敏度高的荧光 PCR 检测体系,可在 3~4 小时内从被检样本中快速、准确、特异、安全、简便地检出 ASFV CP530R 基因,可用于来自家猪、野猪和软蜱的各种样本中微量非洲猪瘟病毒CP530R 基因的检测。满足实验目的的荧光化学物质包括DNA结合染料和荧光标记的序列特异引物或探针。

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非洲猪瘟 ( ASF ) 是由非洲猪瘟病毒 ( ASFV ) 引起猪的一种急性、热性、高度接触性传i染病。从 20 世纪 60 和 70 年代i开始 ASF 由非洲蔓延至欧美地区,2007 年格鲁吉亚、亚美尼亚、阿塞拜疆和俄罗斯都出现了大面积流行,2018年8月也开始在我国快速蔓延开来,对我国养猪业的持续稳定发展构成巨大威胁。因此,本方法为快速诊断非洲猪瘟病毒,提供了有力的技术手段。环境监测在人类食品和宠物食品行业已经成为常规举措,可以帮助人们发现生物安全计划中的薄弱环节。



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荧光定量PCR技术产生并成熟于上世纪90年代,由于该技术实现了PCR从定性到定量的飞跃,能够对PCR反应的全过程进行实时监控,并且自动化程度高,所以该技术从产生到现在短短的十几年时间,在科研及检验领域获得了广泛的应用,成为分子生物学领域不可或缺的一项重要技术。荧光定量PCR技术是在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号随着PCR反应的积累来实时监控PCR反应的进程,并通过分析软件对PCR的反应进行检测分析的技术。系统组成:定量PCR仪、电脑、分析软件、试剂及耗材。根据检测结果,对发生疫情的地方严防死守,对疫点地区生猪全部扑杀,进行无害化处理,防止疫情的扩散。

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进行荧光定量PCR体系的配制时最i好在冰上进行,操作环境不用非得在超净台中进行,环境安静整洁都可以。因为每一个梯度要做三个重复,因此先在1ml的无菌离心管中配制好后再分装入96孔板中。实验中我使用过荧光定量八联管和96孔板,个人推荐96孔板。因为八联管你需要盖上盖子,而且盖子比较的难按下去,稍不慎就把八联管弄断或者液体撒出来。有的时候一下忘记了是从哪边开始的。96孔板比较方便,加完样品后只需附上一层膜,用它自带的板子抚平即可。广州劢博--病毒核酸提取系统销售一个猪场对进场人员的衣物进行熏蒸消毒,专门制作了一个消毒柜,但由于开始设计不理想,消毒柜太大,无法进入屋内,就放在了舍外。上机器前最i好离心一下,让贴在管壁上的液体流下来同时也消掉气泡。


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生猪屠宰企业作为产业链条上的重要主体,防控动物疫病、保证产品质量安全是应尽的责任。屠宰厂(场)生产设施设备和环境一旦被污染,病毒更易长期存活,更易在生猪和猪肉产品中循环扩增,成为病毒的“储存器”“扩增器”。生猪屠宰厂(场)连接着生猪产销等上下游环节,便于“顺藤摸瓜”及时发现和追溯潜在风险。相比其他环节,在生猪屠宰厂(场)开展检测更容易采集样品,实现最i大限度的检测覆盖面,结合临床和剖检情况综合判断。相比其他环节,在生猪屠宰厂(场)开展检测更容易采集样品,实现最i大限度的检测覆盖面,结合临床和剖检情况综合判断。从目前情况看,大部分屠宰厂(场)能够开展非洲猪瘟病毒自检。

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对检测的要求是:生猪屠宰厂(场)应当在驻场官i方兽医监督下,按照生猪不同来源实施分批屠宰,每批生猪屠宰后,对暂储血液进行取样并检测非洲猪瘟病毒;或者根据实际情况,在生猪进场前以生猪运输车辆为单位采集全部生猪血液样品,混合后进行检测。屠宰过程中发现疑似非洲猪瘟典型病变的,要立即停止屠宰,将可i疑生猪转至隔离间,并采集病变组织和血液样品进行检测。对检测结果应用的要求是:屠宰厂(场)检测非洲猪瘟病毒为阴性且按照检疫规程检疫合格的,驻场官i方兽医方可出具动物检疫证明,并注明检测方法、日期和结果等信息。因而,借助PCR对基因快速、敏感、特异而准确的定量成为目前分子生物学技术研究的热点之一。


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