博日养猪场荧光定量PCR常用解决方案
作者:劢博仪器2020/3/17 3:18:41





广州劢博仪器有限公司产品服务包括:非洲***病毒检测、核酸提取纯化、PCR、荧光定量PCR、***检测、非洲***检测、全自动核酸提取纯化系统、病毒核酸提取系统、非洲***病毒快速检测***盒。另外,荧光定量PCR的结果无需通过琼脂糖凝胶电泳来评估,大大节省实验时间,提高实验效率。我们的客户对象是食品企业/公司/厂、食品加工企业/公司/厂、冷冻食品加工企业/公司/厂、养殖场、养猪场、屠宰场、生猪屠宰场。

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一、在动物检疫中对生猪及其产品开展非洲***病毒检测,应当使用我部批准或经中国动物疫病预防控制中心比对符合要求的检测方法及检测***盒(试纸条),确保检测结果准确。短距离可经空气传播、污染的饲料、泔水、剩菜及肉屑、栏舍、车辆、器具和衣服等均可间接传播本病。符合要求的检测方法及检测***盒(试纸条)可从中国动物疫病预防控制中心网站查询。二、应急期间,比对符合要求的检测***盒(试纸条)可使用至2019年6月30日。三、各地畜牧兽医管理部门要加强对非洲***病毒检测***盒(试纸条)生产企业及其产品质量监管,确保产品质量符合要求。


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猪肉制品加工企业在生猪产品原料中检出非洲***病毒核酸阳性的,应当立即封存阳性样品的同批次原料并报告所在地市场监管、畜牧兽医部门,并将阳性样品送至具有检测资质的单位复检。还有的在入舍消毒池中,只是例行把水和火碱放进去,也不搅拌,火碱靠自身溶解需要较长时间,那刚放好的消毒水的作用就不确实了。复检为阳性的,企业要在当地市场监管、畜牧兽医部门监督下,按规定对同批次生猪产品原料进行无害化处理,对相关场所进行彻i底清洗消毒。


广州劢博仪器有限公司产品服务包括:非洲***病毒检测、核酸提取纯化、PCR、荧光定量PCR、***检测、非洲***检测、全自动核酸提取纯化系统、病毒核酸提取系统、非洲***病毒快速检测***盒。这两个发现的结合以及相应的仪器和***的商品化发展导致real-timeQ-PCR方法在研究工作中的运用。我们的客户对象是食品企业/公司/厂、食品加工企业/公司/厂、冷冻食品加工企业/公司/厂、养殖场、养猪场、屠宰场、生猪屠宰场。

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如果检测到荧光信号超过域值被认为是真正的信号,它可用于定义样本的域值循环数(Ct)。或者根据实际情况,在生猪进场前以生猪运输车辆为单位采集全部生猪血液样品,混合后进行检测。Ct值的含义是:每个反应管内的荧光信号达到设定的域值时所经历的循环数。研究表明,每个模板的Ct值与该模板的起始拷贝数的对数存在线性关系,起始拷贝数越多,Ct值越小。利用已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线,因此只要获得未知样品的Ct值,即可从标准曲线上计算出该样品的起始拷贝数。

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扩增序列特异性检测方法是在PCR反应中利用标记荧光染料的***特异寡核苷酸探针来检测产物,它又可分为直接法和间接法。广州劢博--食品加工企业/公司/厂核酸提取纯化生猪屠宰企业作为产业链条上的重要主体,防控动物疫病、保证产品质量安全是应尽的责任。间接的方法就是利用水解探针的策略。目前在real-time Q-PCR中***广泛使用的TaqMan系统就是运用了这个原理。PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团,此时5′端荧光基团吸收能量后将能量转移给临近的3′端荧光淬灭基团(发生荧光共振能量转移,FRET),因此探针完整时,检测不到该探针5′端荧光基团发出的荧光。


广州劢博仪器有限公司产品服务包括:非洲***病毒检测、核酸提取纯化、PCR、荧光定量PCR、***检测、非洲***检测、全自动核酸提取纯化系统、病毒核酸提取系统、非洲***病毒快速检测***盒。目前由于无一统一标准,各个实验室所用的生成标准曲线的样品各不相同,致使实验结果缺乏可比性。我们的客户对象是食品企业/公司/厂、食品加工企业/公司/厂、冷冻食品加工企业/公司/厂、养殖场、养猪场、屠宰场、生猪屠宰场。

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PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。猪群一旦出现不吃料、减料、轻微发热等疑似发病症状,可立即采集猪的唾液、肛肠拭子等混检,有助于疫情的提早发现。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;刚开始时, 探针结合在DNA任意一条单链上;PCR扩增时,Taq酶的5’端-3’端外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。

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实时荧光定量PCR的出现,极大地简化了定量检测的过程,而且真正实现了绝i对定量。不同的核酸序列,哪怕仅有一个碱基的差异,也会体现在熔解温度的差别上。多种检测系统的出现,使实验的选择性更强。自动化操作提高了工作效率,反应快速、重复性好、灵敏度高、特异性强、结果清晰。随着生物芯片技术和荧光探针定量技术的结合,荧光定量PCR在***检测及其他各个领域中的应用前景将更加广阔,令人欣喜。尽管如此我们也应清晰认识到,FQ-PCR技术在我国各个研究领域的应用并不多见,这就需要我国学者迎头赶上,使FQ-PCR技术更充分地i推广,以推动研究工作的快速发展。


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