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PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；刚开始时， 探针结合在DNA任意一条单链上;PCR扩增时，Taq酶的5’端－3’端外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。
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实时荧光定量PCR的出现，极大地简化了定量检测的过程，而且真正实现了绝i对定量。多种检测系统的出现，使实验的选择性更强。自动化操作提高了工作效率，反应快速、重复性好、灵敏度高、特异性强、结果清晰。随着生物芯片技术和荧光探针定量技术的结合，荧光定量PCR在***检测及其他各个领域中的应用前景将更加广阔，令人欣喜。尽管如此我们也应清晰认识到，FQ-PCR技术在我国各个研究领域的应用并不多见，这就需要我国学者迎头赶上，非洲***病毒检测销售，使FQ-PCR技术更充分地i推广，以推动研究工作的快速发展。
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一般猪场而言，只需配备非洲***快速检测试纸条，根据猪场规模配备10-50条即可，场里有异常波动，就可以及时现场检测。一定注意取样方法及注意事项，注意消毒。如果不幸检测到疑是非洲***阳性的样本，建议再反复多卡检测看看，基本上可以做到百i分百准确率。要是不放心，再送检相关部分去做PCR检测。猪场一线需要快速检测技术以尽早确诊，做到早处理、早隔离，但要明确的是，猪场只需要通过合适的检测工具，帮助“定性”即可，不需要深入定量分析，有问题直接捕杀无害化处理。
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磁珠法核酸提取，具有传统DNA提取方法无法比拟的优势，主要体现在：①能够实现自动化、大批量操作，符合生物学高通量的操作要求，使得传i染性***爆发时能够进行快速及时的应对，这一特点使得传统方法望尘莫及；②操作简单、用时短，整个提取流程只有四步，大多可以在36-40分钟内完成；③安全***，不使用传统方法中的氯i仿等******，对实验操作人员的伤害减少到***少，完全符合现代环保理念；④磁珠与核酸的特异性结合使得提取的核酸纯度高、浓度大。
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在PCR扩增中，溶液中的模板变性后低温退火时，引物与探针同时与模板结合。在引物的介导下，沿模板向前延伸至探针结合处，发生链的置换，Taq酶的5′-3′外切酶活性（此活性是双链特异性的，游离的单链探针不受影响）将探针5′端连接的荧光基团从探针上切割下来，游离于反应体系中，从而脱离3′端荧光淬灭基团的屏蔽，接受光刺激发出荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。
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直接的方法指的是标记荧光的探针与扩增产物结合后即直接产生荧光，分子信标（molecular beacon）就属于这一类，它本质上是一种标记荧光的发夹探针，当探针分子呈发夹结构时，结合在其两端的荧光基团距离上接近，使得产生能量转移效应，而不发生荧光。当互补序列出现时，探针与DNA杂交，探针转变成一个开放的结构，呈线性，报告荧光基团与淬灭荧光基团彼此在空间上产生足够的分离，荧光基团脱离了淬灭基团的影响，从而产生可被检测到的荧光。
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