紫外可见分光光度法测定***B2的方法步骤：

1、 待测液的配置：取待测***2片，精密称定、研细，精密称取适量（约相当于***B210 mg），置于1000 mL容量瓶中，加冰醋酸5mL与水100mL，置水浴（100 ℃）加热1小时，时时摇振，使***B2溶解，加水稀释，冷却后加***液（1 mol/L）30 mL。用水稀释至刻度，摇匀，过滤；弃去初滤液，取续滤液作为待测液。

2、 标准溶液的配置：准确称取75mg核黄素（***B2），置于1000 mL容量瓶中，加少量水使***B2溶解，***后加水定容至刻度得到***B2标准***（0.075 mg/mL）。

3、 用移液管分别吸取2mL、4mL、5mL、6mL、8mL***B2标准***（0.075 mg/mL） 于5个25 mL容量瓶中，加水定容至刻度，摇匀。用紫外分光光度计分别测量5个容量瓶中的VB2稀释液，得到5个吸收度数值A444nm。

4、以VB2稀释液浓度为横坐标，A444nm数值为纵坐标，建立VB2浓度与吸收度的标准曲线，然后在444nm波长处测出待测液的吸收度数值，在标准曲线上找到相应的浓度数值即可。

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