武汉迈斯普生物科技有限公司是一家***从事生物***技术服务、技术咨询及产品开发的生物技术服务企业。公司坐落于武汉光谷，由3位归国博士领衔创办。公司长期致力于建立并完善多项基础生物技术服务平台。现凭借自身技术特色，依托光谷生物城技术产业优势，面向***提供的生物技术服务。

尤其在***分析和诊断方面能作定性、***和定量分析，已 成为的分子病理学技术，同时在分析低丰度和罕见的mRNA表达方面已展示了分子生物学的一重要方向。FISH是原位杂交技术大家族中的一员，因其所用探针被荧光物质标记（间接或直接）而得名，该方法在80年代末 被发明，现已从实验室逐步进入临床诊断领域。他的产生是基于对真核细胞转录因子特别是酵母转录因子GAL4性质的研究。基本原理是荧光标记的核酸探针在变性后与已变性的靶核酸在退火 温度下复性；通过荧光显微镜观察荧光信号可在不改变被分析对象（即维持其原位）的前提下对靶核酸进行分析。

武汉迈斯普生物科技有限公司是一家***从事生物***技术服务、技术咨询及产品开发的生物技术服务企业。公司坐落于武汉光谷，由3位归国博士领衔创办。公司长期致力于建立并完善多项基础生物技术服务平台。原位杂交技术发展史原位杂交技术(Insituhybridization，ISH)是由分子生物学、***化学及细胞学相结合而产生的一门新兴技术，始于20世纪60年代。现凭借自身技术特色，依托光谷生物城技术产业优势，面向***提供的生物技术服务。

网上有很多关于FISH的实验步骤教程，但每个探针盒子的操作可能存在差异。懂了原理，才能以不变应万变。

FISH的大致步骤分为探针变性、标本变性、杂交、洗脱、杂交信号放大(适用于适用生物素标记的探针)、复染、封片、荧光显微镜观察FISH结果。

石蜡切片的FISH要点

（1）***固定，采用PH7.2的10%甲醛固定24h是比较适合的，PH很重要。较厚的***块建议切开后再固定。这一点小编已经反复提过很多次了。良好的固定是所有病理实验的前提。

（2）对于石蜡切片来说，采用蛋白酶K作为消化液是更优的选择。消化条件20g/L蛋白酶K在50℃下消化20min。胃蛋白酶是极易失活的，失活了就没法充分消化，消化过度又会使细胞核变模糊。综合来看，小编更推荐蛋白酶K。

（3）石蜡切片的杂交温度一般都是37摄氏度。而杂交时间则需要摸索才能得到更佳时间。不过，一般的过夜孵育基本可以达到目的。

（4）FISH实验中非特异性着色是个难以避免的问题，我们能做的就是尽量减少背景。具体可作为的地方：充分严格漂洗、全程避免干片、探针浓度不宜太高、杂交温度要控制在37℃。