良好的前期标本制备十分重要，这点对于采用秋水仙素刺激得到中期染色体分裂象尤为重要。刺激时间过短或过长都会影响实验观察，因此需要耐心摸索作用时间。

蛋白酶K的作用浓度。浓度高了极易影响细胞核形态，造成模糊不清，浓度低了则探针不易进入细胞核，杂交率大大降低。石蜡切片一般要达到10-30min，不要超过半小时，一般来说，20g/L蛋白酶K在50℃下消化20min足矣。

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FISH：采用了已知序列的、特异性的单链核酸作为探针，标记了生物素或荧光素，在一定的温度和离子浓度下通过碱基互补配对法则，使得DNA-DNA原位杂交，采用荧光法显示，将DNA在细胞爬片、***切片(石蜡切片or冰冻切片)的原始位置上标记出来的一种技术。

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英文全称是 ：in situ hybridization。原位杂交。指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或***切片中核酸进行杂交，从而对特定核酸顺序进行定量***的过程。

①细胞特异性mRNA转录的***，可用于***图谱，***表达和***组进化的研究；②***中病毒DNA/RNA的检测和***，如EB病毒mRNA、人类状瘤病毒和巨细胞病毒DNA的检测；③******、抑******及各种功能***在转录水平的表达及其变化的检测；④***在染色体上的***；⑤检测染色体的变化，如染色体数量异常和染色体易位等；⑥分裂间期细胞遗传学的研究，如遗传病的产前诊断和某些遗传病***携带者的确定，某些的诊断和生物学剂量测定等。

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