武汉迈斯普生物科技有限公司是一家***从事生物***技术服务、技术咨询及产品开发的生物技术服务企业。公司坐落于武汉光谷,由3位归国博士领衔创办。公司长期致力于建立并完善多项基础生物技术服务平台。现凭借自身技术特色,依托光谷生物城技术产业优势,面向***提供生物技术服务。
超滤离心法是利用不同截留相对分子质量(MWCO)的超滤膜进行选择性分离,小分子物质会被过滤到膜的另一侧,而大于膜孔径的高相对分子质量物质则截留在超滤膜上。这种方法比较简单,也不影响外泌体的生物活性,但缺点是外泌体可能会阻塞过滤孔,导致膜的寿命减短,分离效率较低。此外,截留在膜上的外泌体间也会发生粘附,导致产量降低。
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聚乙二醇(PEG)可与疏水性蛋白和脂质分子结合共沉淀,早期应用于从血qing等样本中收集病毒,现在也被用来沉淀外泌体,其原理可能与竞争性结合游离水分子有关。在4℃利用PEG孵育后通过过滤或离心即可沉淀、回收外泌体。采用此种分离方法也存在不少问题:纯度和回收率低,杂蛋白较多,机械力或者吐温-20等化学添加物将会***外泌体等。
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几乎所有类型的细胞都可以分泌外泌体,同时外泌体也广泛存在于体液中,包括血液、眼泪、尿液、唾液、、等(图二)。外泌体的表面标记主要有 CD63、CD81、CD9、TSG101、HSP27 等。外泌体富含胆固醇、鞘磷脂、蛋白和核酸(如DNA、lncRNA、tRNA、mRNA、microRNA)等。
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