英文全称是 :in situ hybridization。原位杂交。包括原位杂交探针设计、探针长度调整、原位杂交时间、细胞通透时间调整、探针浓度、样品固定时间、脱水时间等等。指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或***切片中核酸进行杂交,从而对特定核酸顺序进行定量***的过程。
①细胞特异性mRNA转录的***,可用于***图谱,***表达和***组进化的研究;②***中病毒DNA/RNA的检测和***,如EB病毒mRNA、人类状瘤病毒和巨细胞病毒DNA的检测;③******、抑******及各种功能***在转录水平的表达及其变化的检测;④***在染色体上的***;他的产生是基于对真核细胞转录因子特别是酵母转录因子GAL4性质的研究。⑤检测染色体的变化,如染色体数量异常和染色体易位等;⑥分裂间期细胞遗传学的研究,如遗传病的产前诊断和某些遗传病***携带者的确定,某些的诊断和生物学剂量测定等。
原位杂交技术发展史
原位杂交技术(In situ hybridization,ISH)是由分子生物学、***化学及细胞学相结合而产生的一门新兴技术,始于20世纪60年代。
1969年美国耶鲁大学的Gall等(1969)首先用爪蟾核糖体***探针与其卵母细胞杂交,将该***进行***,与此同时Buongiorno—Nardelli和Amaldi等(1970)相继利用同位素标记核酸探针进行了细胞或***的******,从而创造了原位杂交技术。检测的结果可以是***表达产物的积累效应,因而可检测存在于蛋白质之间的微弱的或暂时的相互作用。
自此以后,由于分子生物学技术的迅猛发展,特别是20世纪70年代末到80年代初,分子、质粒和噬菌体DNA的构建成功,为原位杂交技术的发展奠定了深厚的技术基础。
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