反相色谱影响因素(1)柱长有机小分子和肽类的分辨率随柱长的增加而增加．但是柱长增加并不能使蛋白质和核酸等生物大分子的分辨率显著增加．它们在较短的柱子上往往也有很好的分离效果。(2)流动相的流速。有机小分子和肽类的分辨率对流动相流速非常敏感。而蛋白质和核酸等生物大分子的分辨率则不然。流速越小，柱子越长，色谱峰的宽度就越大，分辨率就越小。制备色谱上样过程中的流速对动态吸附容量影响很大。(3)温度。液相色谱仪的维护与维修，液相色谱仪常见故障与排除方法：泵：单向阀现象：柱压波动范围很大。温度上升，流动相黏度下降，流动速度加快，且流动相与固定相之间的传质速度加快，使分辨率增加。同时，温度上升，分子热运动增加，疏水性作用减弱。升高温度要考虑目标物质的热稳定性。(4)流动相组成。流动相的极性越大，溶质的分配系数越大，洗脱时间越长。RPC多采用降低流动相极性(水含量)的线性梯度洗脱法。水是极性强的溶剂，在反相色谱中常常和基础溶剂配合使用，向流动相中加入不同浓度的、可以与水混溶的有机溶1剂，以得到不同强度的流动相，这些有机溶1剂称为修饰剂。反相色谱中的有机溶1剂。此外，乙醇、四氢呋1喃、异丙1醇及二氧六环也常被用作修饰剂。有机溶1剂梯度的大小也会影响分辨率，一般梯度越小，分辨率越大。

1、高惰性超纯中性硅胶制成，每根色谱柱同时提供柱效与填料性能报告； 2、半制备色谱采用目前的设计方式即顶端自带手动加压装置，具有国际的轴向压缩技术；(1)分析色谱的目的，是分析出混合物中一个(或者几个)纯物质的含量。 3、与国内单位合作即柱筒内壁采用精密的抛光技术和同心化技术，使往壁的光洁度（gt;}12，即表面粗糙度尺a }0.1 um）超过了国内外同类产品并保证了柱管的同心度（0.2um），很好的保证了产品质量的稳定性和； 4、能维持足够高内压，柱床不会塌陷导致柱效急剧下降；如果柱床出现松动塌陷，无需任何工具，只需轻轻旋动顶 端加压装置，便能***原柱内压力和柱效；

液相色谱仪所用基本概念是保留值、塔板数、塔板高度、分离度、选择性等与气相色谱一致。液相色谱所用基本理论：塔板理论与速率方程也与气相色谱基本一致，但由于在气相色谱中以液体代替气相色谱中气体作为流动相，而液体和气体的性质不相同。液相色谱所用的仪器设备和操作条件也与气相色谱不同，所以，液相色谱与气相色谱有一定的差别。主要有以下几方面：　　1、操作条件及应用范围不同：　　对于气相色谱，是加温操作。仅能分析在操作温度下能汽化而不分解的物质，对高沸点化合物、非挥发性物质、热不稳定化合物、离子型化合物及高聚物的分离、分析较为困难，致使其应用受到一定程度的限制，据统计只有大约20%的机物能用气相色谱分析。色谱法应用于分析领域使得分离和测定的过程合二为一，降低了混合物分析的难度缩短了分析的周期，是比较主流的分析方法。　　而液相色谱是常温操作，不受样品挥发度和热稳定性的限制，它非常适合相对分子量较大，难汽化，不易挥发或对热敏感的物质、离子型化合物和高聚物的分离分析，大约占有机物的70%~80%。

制备液相色谱仪可以满足常规实验室纯化制备，并可根据使用需要，搭配紫外检测器组成等度系统,高压二元梯度系统，实现实验室制备提取。广泛用于制药、化工、食品、生化，环保等领域。

　　制备液相色谱仪原理：制备液相色谱是指采用液相色谱技术制备纯物质，即分离、收集一种或多种色谱纯物质。制备液相色谱中的“制备”这一概念指获得足够量的单一化合物，以满足研究和其它用途。制备液相色谱的出现，使液相色谱技术与经济利益建立了联系。这里特别指出一个细节：在绝大多数书本上，凡谈到配制流动相都会谈到后一个过滤的步骤。制备量大小和成本高低是制备液相色谱的两个重要指标。