液相色谱仪所用基本概念是保留值、塔板数、塔板高度、分离度、选择性等与气相色谱一致。液相色谱所用基本理论:塔板理论与速率方程也与气相色谱基本一致,但由于在气相色谱中以液体代替气相色谱中气体作为流动相,而液体和气体的性质不相同。液相色谱所用的仪器设备和操作条件也与气相色谱不同,所以,液相色谱与气相色谱有一定的差别。主要有以下几方面: 1、操作条件及应用范围不同: 对于气相色谱,是加温操作。仅能分析在操作温度下能汽化而不分解的物质,对高沸点化合物、非挥发性物质、热不稳定化合物、离子型化合物及高聚物的分离、分析较为困难,致使其应用受到一定程度的限制,据统计只有大约20%的机物能用气相色谱分析。 而液相色谱是常温操作,不受样品挥发度和热稳定性的限制,它非常适合相对分子量较大,难汽化,不易挥发或对热敏感的物质、离子型化合物和高聚物的分离分析,大约占有机物的70%~80%。
液相色谱仪在使用过程中难免会接触到腐蚀性的物质。这些腐蚀性物质不论是气体、液体还是固体,都有可能损坏仪器的材料和零部件,降低色谱仪的使用寿命。在使用时要尽量避免这种情况的出现。 液相色谱仪流动相类型有多种,流动相性质对样品的分离影响很大。
液相色谱仪流动相类型: 1、按组成可分:单组分流动相和多组分流动相。 2、按极性可分:极性流动相、弱极性流动相和非极性流动相。 3、按作用可分:底剂和洗脱剂。 4、按使用方式可分:等度流动相和梯度流动相。 5、按用途可分:己烷、乙1酸乙1酯、乙醇、乙1腈和水等。 采用二元或多元组合溶剂作为流动相,可以灵活调节流动相的极性和增加选择性,改进分离和调整出峰时间。

如何预防液相色谱仪液相泵的故障: 要保持泵的良好操作性能,液相色谱,必须维护系统的清洁,保证溶剂和***的质量,对流动相进行过滤和脱气.下面列出预防泵故障的几项措施: 1、用高质量***和HPLC级溶剂; 2、过滤流动相和溶剂; 3、脱气; 4、每天开始使用时放空排气,工作结束后从泵中洗去缓冲液; 5、不让水或腐蚀性溶剂滞留泵中; 6、定期更换垫圈; 7、需要时加润滑油; 8、查阅有关泵操作手册中的其它建议。 处于良好操作状态的泵,应该能使色谱图上的基线平稳;保留时间的重复性好。在等度洗脱时压力波动小于2%。梯度洗脱时压力变化应是缓慢和平稳的。 为了使故障发生后尽除,平时应常备密封、单向阀、泵头装置、各式接头、***丝等部件,以及更换工具。
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