液相色谱-武汉赛尔夫
作者:赛尔夫2020/4/23 6:57:49





液相色谱仪的***维护与气相色谱仪没有多大区别,液相色谱仪的几个维护***的部件,液相色谱仪的主要部件有色谱柱、进样器、检测器、泵,下面我们分别来说明这几大部件的***维护方面。

色谱柱大家都不陌生,是我们做分析的必需品,无论是液相色谱仪还是气相色谱仪都离不开色谱柱。色谱柱是化合物分离的关键,我们在安装时要保证阀件管路的清洁,并且不能碰撞、弯曲或强烈震荡色谱柱,在长期不使用色谱柱的时候要用保存封闭,分析结束后要用流动相或适当的溶剂清洗色谱柱,流动相在使用前必须进行脱气处理,尽量不使用或少使用高粘度的流动相,在满足灵敏度的前提下,尽可能的使用小进样量。如果样品比较脏,要进行净化或提纯处理。进样器是液相色谱仪的主要部分之一,我们也要定期进行维护工作。液相色谱仪的检测器在每次分析完成要立即关闭。 泵是液相色谱仪的心脏,我们要定期维护***,这样才能使得其处于状态,能报保证基线平稳,保留时间重现性好,梯度洗脱时压力变化缓慢而且平稳。



色谱分离原理

***液相色谱法按分离机制的不同分为液固吸附色谱法、液液分配色谱法(正相与反相)、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法。

1.液固色谱法 使用固体吸附剂,被分离组分在色谱柱上分离原理是根据固定相对组分吸附力大小不同而分离。分离过程是一个吸附-解吸附的平衡过程。常用的吸附剂为硅胶或氧化铝,粒度5~10μm。适用于分离分子量200~1000的组分,大多数用于非离子型化合物,离子型化合物易产生拖尾。常用于分离同分异构体。

2.液液色谱法 使用将特定的液态物质涂于担体表面,或化学键合于担体表面而形成的固定相,分离原理是根据被分离的组分在流动相和固定相中溶解度不同而分离。分离过程是一个分配平衡过程。

涂布式固定相应具有良好的惰性;流动相必须预先用固定相饱和,以减少固定相从担体表面流失;温度的变化和不同批号流动相的区别常引起柱子的变化;另外在流动相中存在的固定相也使样品的分离和收集复杂化。由于涂布式固定相很难避免固定液流失,现在已很少采用。现在多采用的是化学键合固定相,如C18、C8、氨基柱、基柱和柱。




制备液相色谱仪是近30年发展起来的一种具有高灵敏度、高选择性的快速分离分析技术。它既能用于微量组分的分析测定,又能用于大量的制备分离,灵活多样,液相色谱,其应用范围已超过其他各种分离方法,尤其在中药样品的分析分离方面更充分发挥它的特长,为推动该领域的进步和发展作出了巨大贡献。   根据用途和泵配置的不同,一般可以将常见的实验室级别LC分为以下几种:分析型液相色谱仪(HPLC),半制备液相色谱仪(Semi-PrepHPLC)和制备型液相色谱仪(Prep-HPLC)以及中压液相色谱仪(MPLC)。这三者的原理基本一样,不同之处主要在于泵的大流速,一般而言,分析型HPLC的大流速为10.00mL/min,半制备HPLC为50mL/min,制备HPLC为100mL/min,中压液相色谱更高。而由于泵流速的升高,流通池的光程、体积,管道的内径,六通阀、定量环等零件也会相应改变;并且,根据实验室的需要,可以增加自动接收1器等配件。
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