反相色谱中样品的保留值主要由固定相比表面积、键合相种类和浓度决定,保留值通常随链长增长或键合相的疏水性增强而增大.对于非极性化合物通常遵循以下规则:(弱)非键合硅胶《基lt;C1(TMS)lt;C3lt;***lt;lt;C8≈C18(强)。溶质保留值与固定相表面积成正比,普通载体(80 A°)的比表面积约为250 m2/g,而300A°孔径载体的比表面积约为60 m2/g。这种情况对于输送泵很***,因为泵从设计来说是输送液体而不是输送气体,内部的液体对于活塞来说起到了机油的作用,如果活塞杆还残存了一些缓冲盐,则极易拉伤,造成不可逆转的影响。当其他条件相同时,溶质在300A°孔径(低表面积)色谱柱上的保留值大约为80A°孔径色谱柱上保留值的1/4(60:250),小孔隙柱如高保留的C18柱或石墨柱有利于强亲水性样品洗脱。样品的保留值也可以通过改变流动相组成或溶剂强度来调整,溶剂强度取决于的性质和其在流动相中的浓度。在反相色谱中,采用高溶剂强度、低极性的流动相时可获得较低的保留值。固定相的不同也可以导致选择性发生变化,基柱、柱、C8柱、C18柱等的选择性有很大差异,一般应优先考虑C8柱、C18柱,然后是基柱,再次是柱。据统计,近80%的有机物及无机物可以用液相色谱法进行分离.其中反相色谱中的C18柱是液相色谱中为常用的一类色谱柱。
漏液:
液相色谱仪从流动相瓶到废液瓶之间的流路是一个全封闭体系,内部压力很高,但外部却能保证一滴不漏。如果某个部件发生漏液,那就是故障所在。
漏液的原因分两种:
接触硬件不当:在更换零件如流路管或换柱时,换的接头接口不匹配,造成漏液。要注意不同公司的柱子接头很多是不同的,甚至同一家公司在不同时期生产的液相柱接头也有很大区别。要注意不同公司的柱子接头很多是不同的,甚至同一家公司在不同时期生产的液相柱接头也有很大区别。当然选项用PEEK接头是一较好是一个较好的解决方法,不仅通用性好,而且靠手拧就能保证不漏液。即使是接口本身是匹配的,但是如果操作不当也会漏液,一种不当就是力度把握不好,拧得太紧或太松;另一种不当就是致命的错误:滑丝,这往往是动手能力不太强,螺丝钉很少拧的工作者犯的错误,滑丝的后果不仅是漏液那么简单,常造成重要部件的报废。解决这个问题只能靠恶补基本功来实验,那就是拧螺丝。
液相色谱仪是一种非常常见的仪器,它能够检测出各种不同的液体,还能够测试出它们的成分,这些不同成分的液体在进入仪器之后会呈现出不同的状态,机器在进行运作之后就能够根据状态测试出它们的成分了。现在液相色谱仪已经得到了广泛的应用,它的主要原理就是液相色谱测试,根据这个原理能够得到非常详细的测试内容。检测器漏液是个很麻烦的事,一般都是吸收池的问题,更换的费用相当高。液相色谱仪有很多的优势,在使用的时候我们会发现它的这些优势,下面我们就一起来看看液相色谱仪在使用上具有哪些优势以及购买时有哪些小技巧?使用优势: 液相色谱仪的个优势就是它可以在高压的环境下使用,液体在进入一起之后是保持原状态的,这个时候载液流速比较快,受到的阻力非常的大,为了能够及时的通过色谱柱,这个时候必须要对载液加上一定的高压,液相色谱仪本身具有高压的功能,所以在加进去之后能够让载液产生一定的高压作用。