武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。
以苎麻优良品系'5041-3'子叶作为受体,利用根***农介导法进行了绿色荧光蛋白***的遗传转化研究,农菌株为EHA105,重组质粒为pBINm-GFP5-ER。经农浸染后的子叶外植体经过共培养、选择培养、伸长培养和生根培养后再生出抗性植株,对抗性植株的再生过程进行了GFP荧光检测,结果表明,GFP***能在苎麻中强烈表达,证明GFP***能够在苎麻遗传转化中得到应用。对抗性植株的Southern杂交检测证实外源***已整合到苎麻***组中。
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F-box蛋白通过在UPP(泛素-蛋白酶体途径)中特异识别底物蛋白而参与细胞周期调控、转录调控、细胞凋亡、信号转导等生命活动。很多研究结果表明F-box蛋白通过SCF复合体调节多种的信号转导途径,如IAA、JA、GA和乙烯的信号传导,亚细胞***,并且与植物对非生物胁迫的响应有很大的关系。故其对植物抗逆性研究有重要意义。鹰嘴豆是世界第三大豆类作物,主要生长在干旱和半干旱地区。它具有生育期短,***组小的特点。经过长时间的进化和对不良环境的适应,鹰嘴豆具有了丰富的耐旱、耐低温和耐盐碱等抗逆***,因此具有其自身的优势来研究植物的抗逆机制。目前,鹰嘴豆在分子生物学方面的研究较为少。 本研究从EST库中挑选到两个F-box蛋白***在干旱胁迫下表达,采用RACE技术其全长,并对目的***进行了初步的生物信息学分析和转录水平的表达谱分析,旨在为进一步揭示鹰嘴豆F-box蛋白在植物的生长发育及在逆境信号传导中的作用奠定理论基础。 CarF-box1***的开放阅读框(ORF)长1093bp,编码一条345个氨基酸残基的多肽,含有F-box结构域和Kelch结构域。其理论等电点为5.38,分子量为38.37kDa。CarF-box1***不含有内含子。荧光定量PCR分析表明,CarF-box1在鹰嘴豆的根、茎、叶、花、成熟豆和成熟荚中均有表达,在花中表达极高。
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目的研究1个白木香倍半萜合酶(ASS)的亚细胞***,确定其功能区域,并比较3种瞬时表达体系在亚细胞***研究中的优劣。方法从白木香愈伤***中提取总RNA,采用特异引物RT-PCR方法倍半萜合酶ASS***,并连接于pEZS-NL载体和pFGC5941GFP改造载体上,分别构建pFGC5941-GFP-ASS、pEZS-NL-ASS-GFP 2种植物表达载体,分别利用根***农侵染叶片、***枪轰击洋葱表皮细胞、PEG转化白木香原生质体3种技术进行瞬时转化表达,激光共聚焦显微镜下观察表达出的绿色荧光蛋白(GFP)融合蛋白的亚细胞***。结果在叶片表皮细胞、洋葱表皮细胞及白木香原生质体中,融合蛋白绿色荧光均能被观察到。ASS***与GFP的融合蛋白产物在叶片中***于胞质,在洋葱表皮中***于胞质和细胞核,白木香原生质体中***于胞质和质体。结论 ASS***在白木香原生质体胞质及质体***;对3种体系的结果比较表明,应用不同体系研究蛋白的亚细胞***可能出现不同的结果,这可能与同源或异源表达的植物细胞的特性有关。
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