武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;目前***检测的方法主要有:荧光定量PCR、***芯片、液态生物芯片与微流控技术等。可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。
原位杂交:在研究DNA分子原理的基础上发展起来的一种技术。其基本原理是两条核苷酸单链片段,在适宜的条件下,能过氢键结合,形成DNA-DNA、DNA-RNA或 RNA-RNA 双键分子的特点,应用带有标记的(有性同位素,如3H、35S、32P、荧光素生物素、等非性物质)DNA或RNA片段作为核酸探针,与***切片或细胞内待测核酸(RNA或DNA)片段进行杂交,然后可用自显影等方法予以显示,在光镜或电镜下观察目的 mRNA或DNA 的存在并***;取材与标本固定1.取材对于原位杂交所用的材料要尽可能新鲜,为了防止RNA的降解,取材要迅速,取材后要尽快固定或冷冻保存。
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;2mol/LHCl处理载玻片,用蛋白酶K消化,然后用不同浓度的乙醇脱水。可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。
原位杂交技术的基本原理是利用核酸分子单链之间有互补的碱基序列,将有性或非性的外源核酸(即探针)与***、细胞或染色体上待测DNA或RNA互补配对,结合成专一的核酸杂交分子,经一定的检测手段将待测核酸在***、细胞或染色体上的位置显示出来。
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;杂交结束后,去除杂交液,立即于室温把滤膜放入大体积(300-500ml)的2×***和0。可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。
***组原位杂交(Genome in situ hybridization,GISH)技术是20世纪80年代末发展起来的一种原位杂交技术。它主要是利用物种之间DNA同源性的差异,用另一物种的***组DNA以适当的浓度作封阻,在靶染色体上进行原位杂交。GISH技术应用于动物方面的研究(Pinkel et al.,1986),在植物上早应用于小麦和栽培种的鉴定(余舜武等 2001;荧光原位杂交(Fluorescenceinsituhybridization,FISH)技术是在已有的性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非性DNA分子原位杂交技术。王文奎等 2000)。
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;该技术是指运用cRNA或寡核苷酸等探针检测细胞和***内RNA表达的一种原位杂交技术。可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。
探针的标记物可以是性同位素,也可以是非性生物素和半抗原等,性同位素中,3H和35S为常用,3H标记的探针半衰期长,成像分辨率高,便于***,缺点是能量低,35S标记探针活性较高,影像分辨率也较好,而32P能量过高,致使产生的影像模糊,不利于确定杂交位点。(7)加显色液,封口膜覆盖,避光室温孵育2~20h,随时镜检,当显色满意时入缓冲液Ⅲ终止显色。
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