武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;近研究结果表明,寡核苷酸探针(16-30nt)能自由出入***和***细胞壁,杂交效率明显高于长探针,因此,寡核苷酸探针和不对称PCR标记的小DNA探针或体外转录标记的RNA探针是***原位杂交优选探针。公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。
用干纸巾从滤膜的下方吸干滤膜,用一张新的保鲜膜和新配制的0.5mol/L NaOH重复步骤(1)。 吸干滤膜,将滤膜转移到新的带有1mol/L Tris·Cl(pH7.4)的保鲜膜洼上。5分钟后吸干滤膜,再重复一次该步骤。将滤膜转到盛有150ml预杂交液的玻璃中,在适宜温度(即在水溶液中杂交时用68℃,而在50%甲酰胺中杂交时用42℃)下,预杂交1-2小时。 吸干滤膜,把它转移到有1.5mol/L N***、0.5mol/L Tris·Cl (pH7.4)的保鲜膜小洼上5分钟后吸干滤膜,转移到一张干的滤纸上,置于室温20-30分钟,使滤膜干燥。 将滤膜夹在两张干的滤纸之间,在真空烤箱中于80℃干烤2小时,固定DNA。 将固定在膜上的DNA与32 P标记的RNA进行杂交。
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;用Parafilm膜封好主平板,倒置贮放于4℃,直至获得杂交反应的结果裂解***,按本段下面所述方法,使释放的DNA结合于纤维素滤膜。公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。
①细胞特异性mRNA转录的***,可用于***图谱,***表达和***组进化的研究;②***中病毒DNA/RNA的检测和***,如EB病毒mRNA、人类状瘤病毒和巨细胞病毒DNA的检测;发育时间越短的胚胎越嫩,可以不用或者少用蛋白酶处理,发育时间长的胚胎就需要用蛋白酶来疏松***,以便于杂交。③******、抑******及各种功能***在转录水平的表达及其变化的检测;④***在染色体上的***;⑤检测染色体的变化,如染色体数量异常和染色体易位等;⑥分裂间期细胞遗传学的研究,如遗传病的产前诊断和某些遗传病***携带者的确定,某些的诊断和生物学剂量测定等。
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;4)的保鲜膜小洼上5分钟后吸干滤膜,转移到一张干的滤纸上,置于室温20-30分钟,使滤膜干燥。公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。
取材与标本固定
1. 取材 对于原位杂交所用的材料要尽可能新鲜,为了防止RNA的降解,取材要迅速,取材后要尽快固定或冷冻保存。
2.固定 进行原位杂交的***或细胞必须经过固定处理,固定的目的是为了①保持细胞形态原有结构;②保存细胞内的DNA或RNA的水平;③使探针易于进入细胞或***内。
3.固定液 常用固定液有10%甲醛、4%多聚甲醛、冰醋酸-酒精混合液、Bouin氏固定液等。这些固定液都有不同的优缺点因此要根据具体的实验对象,选择的固定液。
4.固定方法 ***标本取材后,迅速放入固定液中2~4h,取材***大小为1cm×1cm×0.5cm,不宜太大。必要时,动物***可进行灌流固定,然后将***按要求取材放入20%蔗糖中,4℃过夜,次日可行冰冻切片。
版权所有©2025 产品网