武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。
目的研究1个白木香倍半萜合酶(ASS)的亚细胞***,确定其功能区域,并比较3种瞬时表达体系在亚细胞***研究中的优劣。方法从白木香愈伤***中提取总RNA,采用特异引物RT-PCR方法倍半萜合酶ASS***,并连接于pEZS-NL载体和pFGC5941GFP改造载体上,分别构建pFGC5941-GFP-ASS、pEZS-NL-ASS-GFP 2种植物表达载体,分别利用根***农侵染叶片、***枪轰击洋葱表皮细胞、PEG转化白木香原生质体3种技术进行瞬时转化表达,激光共聚焦显微镜下观察表达出的绿色荧光蛋白(GFP)融合蛋白的亚细胞***。结果在叶片表皮细胞、洋葱表皮细胞及白木香原生质体中,融合蛋白绿色荧光均能被观察到。ASS***与GFP的融合蛋白产物在叶片中***于胞质,在洋葱表皮中***于胞质和细胞核,白木香原生质体中***于胞质和质体。结论 ASS***在白木香原生质体胞质及质体***;对3种体系的结果比较表明,应用不同体系研究蛋白的亚细胞***可能出现不同的结果,这可能与同源或异源表达的植物细胞的特性有关。
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。
***转运蛋白P-type ATPase(HMA)已被证实参与植物体内的***运输,HMA5主要参与铜的转运。在模式植物拟南芥、水稻和黄瓜中对HMA5***进行了较多的研究,但是对豆科植物HMA5的研究鲜见报道。实验室前期在天蓝苜蓿中分离到一个与铜胁迫及共生结瘤相关的HMA5***,为了对此类***在豆科植物共生结瘤中的作用进行深入研究,本研究对全***组已测序的模式豆科植物蒺藜苜蓿的***组进行筛查,寻找HMA5同源***并通过表达模式分析初步判断其与共生结瘤的关系,在此基础上,以其中的MTR_8g079250***为对象,进行亚细胞***、***表达、RNA干扰和过量表达等研究,初步鉴定该***在共生结瘤中的功能。1、MTR_8g079250的亚细胞***构建MTR_8g079250的洋葱表皮亚细胞***载体,通过***枪轰击转化洋葱表皮细胞,在激光共聚焦显微镜下观察到MTR_8g079250::GFP融合蛋白主要在细胞膜上表达,在细胞核上也有微量的表达;构建MTR_8g079250的叶片亚细胞***载体,通过根***农介导***叶片的方式进行转化,结果表明目的***主要***在细胞膜和细胞核上;2、MTR_8g079250的***表达构建PMTR_8g079250::GUS融合表达载体,通过农发根转化的方式转入蒺藜苜蓿根部,经培养后,进行GUS染色观察。
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。
综述了根***农介导的遗传转化近几年获得的新进展在转化机理方面,对农自身转录与调控的研究已相当深入,而对有关的植物编码因子的研究也已取得了实质性进展;在转化范围上,对***与裸子植物的转化取得了不少进展,单子叶植物尤其是一些有重要经济价值的禾谷类作物应用农介导相继获得了转化植株;在转化方法方面,发展了新的简单有效的整体植株法,并将T-DNA转移和整合原理结合到***枪等DNA直接转移方法上;***人工染色体与农的联合应用赋予了其大片段DNA转化的功能.针对上述领域,指出了其中仍然存在的一些问题并提出了一些构想.